碧云天生產(chǎn)的BL21超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞,英文名BL21 Super Competent Cells,是一種可以用于非毒性蛋白表達(dá)的E. coli BL21即用型化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞。使用pUC19質(zhì)粒進(jìn)行熱激活轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化效率可以高達(dá)1×107cfu/μg DNA以上。
BL21表達(dá)大腸桿菌RNA聚合酶,適合依賴于大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達(dá)(如pGEX、pMAL等)。該菌株不表達(dá)T7 RNA聚合酶,不適合于T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的蛋白表達(dá)(如原核表達(dá)載體pET系列)。
BL21系最早開發(fā)的原核表達(dá)菌株,在其基礎(chǔ)上衍生了BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3)等一系列原核表達(dá)菌株。
BL21菌株的基因型為E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]κ-12(λS) [1]。其中ompT可減少外膜蛋白酶的表達(dá)量,從而減少重組蛋白的水解,提高表達(dá)產(chǎn)量;hsd基因變異可致菌株細(xì)胞內(nèi)的I型限制酶EcoK或EcoB活性缺失,從而提高PCR產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化效率。
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