碧云天生產(chǎn)的ArcticExpress (DE3) pRARE2超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞,英文名ArcticExpress (DE3) pRARE2 Super Competent Cells,是一種用于可溶重組蛋白表達(dá)用的E. coli ArcticExpress (DE3) pRARE2即用型化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞。使用pUC19質(zhì)粒進(jìn)行熱激活轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化效率可以高達(dá)1×108cfu/μg DNA以上。
ArcticExpress (DE3) pRARE2在ArcticExpress (DE3)基礎(chǔ)上改造而成。該菌株在低溫條件下(4-12℃)具有優(yōu)異的蛋白折疊功能,防止包涵體形成,增加具有生物活性的重組蛋白的得率。
ArcticExpress (DE3)攜帶pRARE2質(zhì)粒,該質(zhì)粒表達(dá)適應(yīng)低溫的伴侶蛋白cpn10和cpn60。在低溫下比傳統(tǒng)伴侶蛋白GroEL、GroES等具有更強(qiáng)的促蛋白折疊功能[1];此外,帶有氯霉素抗性的pRARE2質(zhì)粒可補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的7種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)對(duì)應(yīng)的tRNA,達(dá)到高效表達(dá)的目的。
ArcticExpress (DE3) pRARE2菌株可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,因而廣泛用于pET系列、pGEX、pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。該菌株具有四環(huán)素、慶大霉素、氯霉素抗性。
ArcticExpress (DE3) pRARE2菌株的基因型為E. coli B F– ompT hsdS(rB–, mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2 (CamR)。
關(guān)鍵字: 感受態(tài)細(xì)胞;超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞;碧云天代理;
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