名稱:蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒
規(guī)格:2×100mL | 2×500mL
存儲(chǔ):室溫避光保存,有效期至少12個(gè)月
自備材料:
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍(lán)化液(如稀氨水、碳酸鋰溶液等)
3、系列乙醇
4、4%的多聚甲醛 (Cat#: PH0427)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
蘇木精-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),簡(jiǎn)稱 HE 染色法 ,是病理學(xué)常規(guī)制片中最基本的染色方法。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。
染色過(guò)程需要優(yōu)化,著色情況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。
染色原理:
1、 細(xì)胞核染色的原理: 蘇木素為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。
2、 細(xì)胞漿染色的原理: 伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的pH值密切相關(guān)。當(dāng)染液的pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
3、 分化作用: 染色后,用某些特定的溶液將組織過(guò)多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過(guò)程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過(guò)多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。
4、 返藍(lán)作用:分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過(guò)程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來(lái)水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時(shí)間較長(zhǎng)。
關(guān)鍵字: 蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒 ;蘇木素伊紅;
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