產(chǎn)品名稱 : 革蘭氏染色液
規(guī)格:4×100mL | 4×250mL | 4×500mL
有效期:12個月
存儲 常溫運輸,陰涼避光保存,有效期12個月
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物,革蘭氏陽性菌細胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,乙醇脫色時,肽聚糖脫水使孔徑縮小,故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上,呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,脫色后類脂外膜迅速溶解,縫隙加大,結晶紫與碘復合物溶出,因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復染,呈紅色。
操作步驟:
1、標本處理
(1).有菌部位的標本,如痰液、糞便、各種拭子、創(chuàng)面等可直接涂片。
(2).無菌部位的標本,如腦脊液、胸水、腹水、膽汁、尿液、關節(jié)液等,應取適量標本(最高可達5-7ml),經(jīng)3000rpm 離心10min.,取沉渣涂片染色。
2、涂片制作
菌液涂片時,用接種環(huán)沾取菌液點在載玻片上,標本可直接在玻片上涂布;菌落涂片時,先取生理鹽水一滴,置玻片上,用接種針挑取菌落在鹽水中涂布。制作的涂片應自然干燥,并經(jīng)火焰固定,固定的溫度不宜過高,以玻片背面接觸手背不燙為準,否則可能使細菌形態(tài)改變。將固定后的涂片進行染色。
3、染色
一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:
(1)加上結晶紫后,染色 1 分鐘,水洗。
(2)加上碘液后染色 1 分鐘,水洗。
(3)加上 95%酒精,搖動玻片,根據(jù)涂片厚度,脫色約 20-60 秒,水洗,吸去水分。
(4)加上蕃紅后,染色 1 分鐘,水洗。
(5)吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。
注意:革蘭氏染色的關鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結果,如陽性菌培養(yǎng)時間過長,或已死亡及部分菌體自行溶解,
都常呈陰性反應。
4、結果觀察:革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應為準,過于密集的細菌,常常呈現(xiàn)假陽性。
關鍵字: 革蘭氏染色液;革蘭氏;
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