參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：里氏埃里希氏體PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P406
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實驗設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標準曲線及待測樣本數(shù)量，計算所需反應孔數(shù)，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數(shù)=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應孔數(shù)計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 腎癌Wilms細胞;G401 大鼠氣管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL焦地黃苯乙醇甙B1（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Jionoside B1

長尾綠猴腎細胞;4647N-6022質(zhì)量規(guī)格：>98%,GSNOR抑制劑N6022

TEK Others Human  Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 巴柳氮鈉（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Balsalazide

CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2依帕司他（標準品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定Epalrestat

LX-2, 肝星形細胞株 小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素)，GT1.1細胞 OK(負鼠(opossum)腎細胞)三苯甲基坎地沙坦西來替昔酯質(zhì)量規(guī)格：>99%Trityl candesartan cilexetil

里氏埃里希氏體PCR檢測試劑盒硅酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCSilicic  hydrate  人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA檢測試劑盒HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 96T/48T  石蠟切片總膽(酯酶法)菲律賓(FILIPIN)熒光直接染色試劑盒20

一氧化硅(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRSilicon monoxide  大鼠氧化酶(DAO)試劑盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit  ELISAKitLebtospira人鉤端螺旋體IgG規(guī)格：48T/96T

鎢硅酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSilicotungstic  hydrate  CLIAKitfoXB2ELISAKit大鼠血栓素B2規(guī)格：48T/96T  大鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乙酸銀(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRSilver acetate  凝血酶時間(TT)檢測試劑盒20  人微管多特異性有機陰離子轉(zhuǎn)運蛋白1(ABCC2)試劑盒 Human Canalicular multispecific organic anion anspoer 1,ABCC2 ELISA kit

乳糖酸(>98%,BC)Lactobionic 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC  大量腺病毒沉淀法化試劑盒1  鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

L-氨基酸氧化酶L-Amino  oxidase >4 U/mg質(zhì)量規(guī)格：BC  RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanplaceagrowthfactor,PLGFELISA試劑盒人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-氨基酸氧化酶L-Amino  oxidase >4 U/mg質(zhì)量規(guī)格：BC  小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  ELISAKitIFN-α豬α干擾素規(guī)格：48T/96T

乙酸鑭五水(>99%,BR)Lanthanum (III) acetate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  Rat cholesterol ester ansfer protein (CETP) ELISA Kit 大鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒  Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T