參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P438
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1麥芽三糖(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：供檢查用MALTOTRIOSE

ENG Others Mouse 小鼠 Endoglin / ENG / CD105 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸丙卡特羅（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Procaterol HCl

心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)泛酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 D-pantothenate

CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 尼達(dá)尼布；BIBF 1120質(zhì)量規(guī)格：三重血管激酶抑制劑Nintedanib (BIBF1120)

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-2H3硫普羅寧,N-(2-丙酰)甘氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTiopronin

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒更昔洛韋Ganciclovir質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  Mouseα-galactoyl,GalELISA試劑盒小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  胎兒纖連蛋白(fFN)ELISA試劑盒 ，英文名： fFN ELISA Kit

更昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Ganciclovir質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品  小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒 ，英文名： Des ELISA Kit  MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ADA單鈉鹽ADA mono salt質(zhì)量規(guī)格：>99%  大鼠前列腺酸性1酸酶(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒RatProstaticPhosphatase,PAPELISAKit 96T/48T  Elisa牛結(jié)核病抗體檢測(cè)試劑盒2*96孔2*96孔

N-（乙酰氨基）亞氨基二乙酸二鈉鹽ADA di salt質(zhì)量規(guī)格：>98%  人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit  HumanAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24),替可克肽ACTH (1-24), human質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T  cit瓜氨酸規(guī)格：96T/48T

緩激肽Bradykinin質(zhì)量規(guī)格：>98%  人催產(chǎn)素(OT)試劑盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit  Humanalkalinephosphatase，ALPELISAKit人堿性1酸酶(ALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D 13223 (氟吡汀代謝產(chǎn)物)D 13223 (Flupirtine Metabolite)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

伊潘立酮-d3Iloperidone-d3質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口  Hollande固著液50毫升  豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 Guinea Pig Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit