參數規(guī)格：
產品名稱：賈第蟲通用PCR檢測試劑盒
型號　:　　 EY00P524
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
實驗操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標準曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復 3 次。
5,按表 2 依次進行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質控 ERC 的制備
根據待測樣本的殘留量設置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
三、陰性質控 NEG 的制備

根據實驗設置陰性質控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標記為陰性質控 NEG。 注：陰性質控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進行樣本前處理。
四、 qPCR 反應液的制備和加樣
1，根據所要檢測的標準曲線及待測樣本數量，計算所需反應孔數，一般做 3 個重復孔/樣。
反應孔數=  (6 個濃度梯度+1 個無模板對照 NTC+1 個陰性質控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個待測樣本檢測時都同時做樣本 ERC 。                  2，根據反應孔數計算本次實驗所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應孔數+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應孔數+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應孔數+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進行加樣：
                                  表 3.各反應孔加樣示例

注意事項
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
 海馬星形膠質細胞(HA-h)(1×106)氯波必利（標準品）質量規(guī)格：UV法含量測定Clebopride

SK-N-SH, 神經母細胞瘤細胞醉魚草皂苷IVb（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Buddlejasaponin Ivb

惡性色素瘤細胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL厄多司坦（標準品）質量規(guī)格：含量測定Erdosteine

M1 小鼠白血病細胞吡美莫司;匹美莫司質量規(guī)格：>95%,BRPimecrolimus

KIT Others Human  c-KIT / CD117 細胞裂解液 (陽性對照) 己二酸二異丁酯(>99.0%(GC))質量規(guī)格：>99.0%(GC)Diisobutyl Adipate

賈第蟲通用PCR檢測試劑盒甘草酸(β型),18beta-甘草酸(標準品)18-beta-glycyrrhetic質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  15%聚烯酰胺尿素(7M)凝膠500毫升  埃博拉病毒(EBOV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

OXOID胰蛋白胨Tryptone 質量規(guī)格：BR，進口  MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA試劑盒小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  humanserumdeprivatioesponse,SDPRELISA試劑盒人血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

β-萘黃酮β-Naphthoflavone質量規(guī)格：>99%,進分  小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒 ，英文名： VIP ELISA Kit  ELISAKitSmad1小鼠信號轉導分子規(guī)格：48T/96T

舒巴坦酸(標準品)Sulbactam 質量規(guī)格：≥98%,標準品  小鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA檢測試劑盒Mouseosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit 96T/48T  HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去甲基氯化西酞普蘭鹽酸鹽Demethylchloro Citalopram 質量規(guī)格：美國進口  蛋白巰基化(S-thiolation)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20  轉基因植物EPSPS基因核酸檢測試劑盒 48T

3-氧西酞普蘭3-Oxo Citalopram質量規(guī)格：美國進口  Ratmonocytechemotacticprotein2,MCP-2ELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humansolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(R)-草酸西酞普蘭(R)-Citalopram Oxalate質量規(guī)格：美國進口  小鼠鋅結合α2-糖蛋白1(αZGP1)ELISA試劑盒 ，英文名： αZGP1 ELISA Kit  ELISAKitAGEs小鼠晚期糖基化終末產物規(guī)格：48T/96T

西酞普蘭N-氧化物Citalopram N-Oxide質量規(guī)格：美國進口  兔子轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T  HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T