參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：馬媾疫錐蟲PCR檢測(cè)試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P1213
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測(cè)樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測(cè)樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測(cè)樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測(cè)樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測(cè)樣本×2) ×3 注：待測(cè)樣本×2 是為了讓每個(gè)待測(cè)樣本檢測(cè)時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 Hela, 細(xì)胞系 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3TK細(xì)胞 SPA-A1(肺腺癌細(xì)胞)泡蛙肽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPhysalaemin

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7PKI-tide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPKI-tide

FGFR2 Others Human  FGFR2 / CD332 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 血小板因子4質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPlatelet Factor 4 (58-70)(human)

小鼠子細(xì)胞;U14Pneumadin，質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRPneumadin (human)

IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1酸鋅四水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRZinc phosphate tetrahydrate

馬媾疫錐蟲PCR檢測(cè)試劑盒草質(zhì)素(標(biāo)準(zhǔn)品）Herbacetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱HumanBLC-1/CXCL13ELISAKit人B-細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T  人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

丙溴1(標(biāo)準(zhǔn)品)Profenofos質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品  非突觸體腦組織線粒體分離試劑盒10  小鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒 Mouse Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit

吡丙(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%)Pyriproxifen質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%  ELISAKitTGFβ2人轉(zhuǎn)化生長因子β2規(guī)格：48T/96T  信號(hào)識(shí)別顆?？贵w(SRP)ELISA試劑盒 ，英文名： SRP ELISA Kit

稻豐散(0.105mg/ml)Phenthoate solution質(zhì)量規(guī)格：0.105mg/ml  小鼠腺來源血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ，英文名： EG-VEGF ELISA Kit  Mousehepaticlipase,HLELISA試劑盒小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Vinblastine Sulfate  PVELISA試劑盒魚卵黃高1蛋白規(guī)格：96T/48T  1脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒 ，英文名： PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit

硫酸長春堿(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分Sigma V1377Vinblastine Sulfate  小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒 ，英文名： FASL ELISA Kit  Ratbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒大鼠骨堿性1酸酶(BALP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

替莫唑胺質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTemozolomide  大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 96T/48T  Humancoloncancer-specificaigen-3,CCSA-3ELISA試劑盒人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

替莫唑胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Temozolomide  人白介素15(IL-15)試劑盒 Human IL-15 ELISA KIT  HumanFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T