參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：克氏錐蟲PCR檢測試劑盒
型號(hào)　:　　 EY00P1212
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)操作過程：
一、 CHO DNA 定量參考品的稀釋及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
用試劑盒中提供的 DNA dilution buffer 將 CHO control DNA 進(jìn)行梯度稀釋， 稀釋濃度依 次為 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具體操作如下：
1.將試劑盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
輕微振蕩混勻，簡短快速離心。
2.取 6 支干凈的 1.5ml 離心管，分別標(biāo)記為 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分別加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后渦旋振蕩混勻 5- 10s 后短時(shí)快速離心 5s，渦旋振蕩和快速離心各重復(fù) 3 次。
5,按表 2 依次進(jìn)行 6 次梯度稀釋操作，稀釋操作同步驟 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀釋

二、加樣回收質(zhì)控 ERC 的制備
根據(jù)待測樣本的殘留量設(shè)置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加樣濃度  (以制備加 45pg  CHO control DNA 的樣本 ERC 為例)，操作如下：
1，取待測樣本 100u，加至 1.5ml 干凈的離心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混勻，標(biāo)記為樣本 ERC。
注：樣本 ERC 和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
三、陰性質(zhì)控 NEG 的制備

根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性質(zhì)控，操作如下：
1，取 100ul 樣本基質(zhì)溶液(或洗脫液)加至 1.5ml 干凈的離心管中標(biāo)記為陰性質(zhì)控 NEG。 注：陰性質(zhì)控 NEG 樣本和同批待測樣本需一起進(jìn)行樣本前處理。
四、 qPCR 反應(yīng)液的制備和加樣
1，根據(jù)所要檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線及待測樣本數(shù)量，計(jì)算所需反應(yīng)孔數(shù)，一般做 3 個(gè)重復(fù)孔/樣。
反應(yīng)孔數(shù)=  (6 個(gè)濃度梯度+1 個(gè)無模板對(duì)照 NTC+1 個(gè)陰性質(zhì)控 NEG+待測樣本×2) ×3 注：待測樣本×2 是為了讓每個(gè)待測樣本檢測時(shí)都同時(shí)做樣本 ERC 。                  2，根據(jù)反應(yīng)孔數(shù)計(jì)算本次實(shí)驗(yàn)所需的各組分的所需總量以制備 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反應(yīng)孔數(shù)+2) ×15ul    (含有 2 孔的損失量)
10×CHO qPCR mix=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反應(yīng)孔數(shù)+2) ×2ul
3，各試劑置于冰上融化，振蕩混勻，按表 3 所示進(jìn)行加樣：
                                  表 3.各反應(yīng)孔加樣示例

注意事項(xiàng)
1.整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
 HeLa229細(xì)胞，細(xì)胞(HPV-18永生化細(xì)胞) 小鼠垂體瘤細(xì)胞,GT1-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)TAE684質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的ALK抑制劑NVP-TAE684

HBE(支氣管上皮樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2青蒿酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Artemisic

hMSC-AT Pellet 體脂肪組織的間質(zhì)干細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞總RNAHRCEpiC NA鏈霉親和素質(zhì)量規(guī)格：>15Units/mg proteinStreptavidin from Streptomyces avidinii

CM-M089小鼠皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL西他沙星質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,水合物,BRSitafloxacin Hydrate

HFE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) DHBS；3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%DHBS

克氏錐蟲PCR檢測試劑盒草質(zhì)素苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Rhodionin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品  3’末端RNA探針同位素([32P]pCp)連接酶標(biāo)記試劑盒20  胃泌素(Gasin)ELISA試劑盒 ，英文名： Gasin ELISA Kit

紅景天素；草質(zhì)素甙；Rhodiosin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥88%，標(biāo)準(zhǔn)品  MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  MouseNeuroophin4,-4ELISA試劑盒小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

派洛寧Y(Ind Grade)Pyronin Y質(zhì)量規(guī)格：Ind Grade  小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  ELISAKitNA兔去甲規(guī)格：48T/96T

魚精蛋白硫酸鹽來源于鮭魚 Protamine sulfate from Salmom質(zhì)量規(guī)格：Grade II,sigma分裝  Rat osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit 大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒  guineapigEndothelin1,ET-1ELISAKit豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸長春堿(進(jìn)分)Vinblastine Sulfate質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分Sigma V1377  5-TAMRA蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/)  壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

替莫唑胺Temozolomide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  Mousefreefattys,FFAELISA試劑盒小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  humanubiquitinD,UBDELISA試劑盒人泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

替莫唑胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Temozolomide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品  小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  ELISAKitpANCA小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體規(guī)格：48T/96T

氨魯米特Aminoglutethimide質(zhì)量規(guī)格：>99%，USP30,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)  Rat peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒  HumanAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T