HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)
1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 HEL
細(xì)胞背景描述 HEL細(xì)胞是一株淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞株,源自一位30歲白人男性;該患者患有惡性紅細(xì)胞白血病,能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。HEL細(xì)胞的EB病毒核抗原陰性,沒有表面免疫球蛋白與細(xì)胞質(zhì)免疫球蛋白。HEL細(xì)胞表達(dá)HLA抗原(HLA-A3、AW32、BW35),β-2小球蛋白,一定比例的細(xì)胞還表達(dá)La抗原。HEL細(xì)胞提供了一種用于研究紅細(xì)胞分化和球蛋白基因表達(dá)的模型,它類似于小鼠中的血友病。
供體年齡 男
組織來源 外周血
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 白血病細(xì)胞
生長特性 半貼半懸
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞,懸浮細(xì)胞是活細(xì)胞,可用離心管收集細(xì)胞懸液后,于1200 rpm(250g左右)離心收集細(xì)胞;
2、部分貼壁不牢的細(xì)胞可直接吹起使之懸浮;
3、貼壁較牢固的細(xì)胞可用PBS潤洗后,在培養(yǎng)瓶中加入1~2毫升0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA)置于37℃培養(yǎng)箱中消化,待細(xì)胞變圓收縮后可用4~6 mL左右完全培養(yǎng)基進(jìn)行終止消化,輕輕吹散細(xì)胞后離心搜集細(xì)胞;
4、將懸浮的細(xì)胞和貼壁的細(xì)胞收集到一起混勻后按比例接種到新的培養(yǎng)瓶。
傳代比例(密度) 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
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