EB不能穿過活細(xì)胞膜,可通過死細(xì)胞破損膜對細(xì)胞核DNA染色,含一個可嵌入堆積堿基之間的一平面基團(tuán),該基團(tuán)固定位置及與堿基密切接近,致染料與DNA結(jié)合現(xiàn)熒光,因EB-DNA復(fù)合物熒光產(chǎn)率遠(yuǎn)大于未結(jié)合染料熒光,當(dāng)電泳凝膠中含游離EB,可測少量DNA,是高靈敏熒光試劑,也是重要熒光染料,常測DNARNA.與DNA結(jié)合抑制DNA復(fù)制轉(zhuǎn)錄溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號,可用Polaroid底片或帶CCD成像頭的凝膠成像處理系統(tǒng)拍攝。對于在電泳后進(jìn)行凝膠染色,應(yīng)先用水將儲存液樣品稀釋到0.5μg/ml,再將凝膠孵育15-30分鐘。通常無需脫色,但是如果必須降低背景色,則可在水中脫色15分鐘。然后可在紫外燈箱(254nm波長)中檢測DNA條帶。也可將溴化乙啶加到凝膠和電泳緩沖液(終濃度0.5μg/ml)中,并在電泳后立即顯影。
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