產(chǎn)品信息
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格/元 |
M4410 | 超快轉(zhuǎn)膜緩沖液(20x) | 500ML | 300 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
超快轉(zhuǎn)膜液使用獨(dú)特配方,能高效超快地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。濕轉(zhuǎn)法(Tank blot)或半干轉(zhuǎn)法(Semi-dry blot)都可以使用。 
產(chǎn)品特點(diǎn):
超快和環(huán)保:能在15-35分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過(guò)程。超快轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇,減輕了對(duì)實(shí)驗(yàn)者和環(huán)境的傷害。
兼容性好:超快轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠,預(yù)制膠,Bis-Tris膠等多種凝膠。
轉(zhuǎn)移效率高:超快轉(zhuǎn)膜液對(duì)分子量跨度較大的蛋白也有保存與運(yùn)輸方法
使用說(shuō)明
轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備:5-6張裁好的濾紙:裁好的轉(zhuǎn)印膜;足夠的1×超快轉(zhuǎn)移buffer。
一、濕轉(zhuǎn)法(Tank blot)
1、配制1×超快轉(zhuǎn)膜液
1升1×Western超快轉(zhuǎn)膜液:取50ml 20×超快轉(zhuǎn)膜液,膠乳750ml雙蒸水,混勻后膠乳200ml甲醇,混勻即可,現(xiàn)配現(xiàn)用,配好后置于冰上存放)。
2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕。
3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中(注意:在使用6%或8%分離膠轉(zhuǎn)移大分子蛋白時(shí),應(yīng)該降低甲醇含量至10%,以獲得更好轉(zhuǎn)移效果)。
按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)。
一、半干轉(zhuǎn)(Semi-dry blot)
1、按照下表配制1×超快轉(zhuǎn)膜液
2、將濾紙浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕。
3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS;隨后將凝膠浸泡在1×超快
轉(zhuǎn)膜液中。
注意:水中漂洗時(shí)間一定不能超過(guò)2分鐘,否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。
4、按照以下順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu)。
半干轉(zhuǎn)時(shí),濾紙、膠、膜之間的大小,一般是下層濾紙≥膜大于等于膠≥上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸;濾紙、膠、膜之間千萬(wàn)不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì)造成短路。
注意:PVDF膜使用前需用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕30秒。
三、轉(zhuǎn)移條件
1、濕轉(zhuǎn)
推薦使用恒流轉(zhuǎn)移,電流可設(shè)置350-400mA,轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多,可以承受大電流,并且發(fā)熱量較低。
注:不推薦使用恒壓轉(zhuǎn)移,因轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多,當(dāng)電壓在100v左右時(shí),電流會(huì)達(dá)到400mA,此時(shí)已達(dá)到普通電泳儀器zui大電流,隨著時(shí)間延長(zhǎng),可能無(wú)法達(dá)到穩(wěn)定的100v電壓。
2、半干轉(zhuǎn)
保存:常溫保存。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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