名稱：Sulfo-Cyanine3.5 NHS ester

    Sulfo-Cy3.5 NHS ester

    Sulfo-Cyanine3.5 SE

中文名：磺酸基Cy3.5活性酯

CAS：2231670-91-8

分子式：C42H40N3K3O16S4

分子量：1088.33

純 度：≥95%

外 觀：深紫色固體

溶解性：溶于水，DMF，DMSO

Ex/Em：~678/695 nm

消光系數(shù)：250, 000 L?mol-1?cm-1

A280/Amax：18%

結(jié)構(gòu)式：

保存與運(yùn)輸方法:

保存：-20°C避光干燥保存，2年有效。

運(yùn)輸：室溫運(yùn)輸。

磺化Cy3.5 (sulfo Cyanine 3.5; sulfo Cy3.5) 是一種發(fā)紅色熒光的花青素類熒光染料?；腔疌y3.5是磺化修飾過(guò)的Cy3.5，水溶性好，它在顯影時(shí)可以用561nm或者594nm的激光束激發(fā)然后用 Texas Red? 或相似的濾片觀察，所以也是一種非常常用的標(biāo)記染料?；腔疌y3.5-NHS可以用來(lái)標(biāo)記蛋白，抗體，多肽,核酸分子等。由于強(qiáng)水溶性加帶電荷，磺化花青素標(biāo)記的生物分子更穩(wěn)定，不易產(chǎn)生疏水性聚集。NHS活化酯 （N-羥基琥珀酰亞胺酯，N-hydroxysuccinimide ester，succinimidyl ester）是生物標(biāo)記反應(yīng)中常用的活化基團(tuán)。它活化Cy3.5分子中的羧基，讓它可以和目標(biāo)生物分子上的胺基（伯胺或者仲胺）反應(yīng)生成穩(wěn)定的酰胺鍵，從而把磺化Cy3.5分子標(biāo)記到生物大分子上。由于游離胺基是蛋白，抗體，多肽表面的常見(jiàn)官能團(tuán)（來(lái)自于賴胺酸側(cè)鏈），磺化Cy3.5-NHS可以和它們直接反應(yīng)。核酸分子中天然不帶游離胺基，只有胺基修飾過(guò)的RNA或者DNA才可以和磺化Cy3.5-NHS反應(yīng)。磺化Cy3.5-NHS活化酯的水溶性非常好，所以可以在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系中直接使用，不需要有機(jī)溶劑助溶，特別適合標(biāo)記蛋白等對(duì)有機(jī)溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3.5水溶性極好，并且染料分子本身帶電荷，標(biāo)記到蛋白表面后不會(huì)引發(fā)疏水性蛋白聚集，提高熒光標(biāo)記產(chǎn)物的穩(wěn)定性?；腔疌y3.5-NHS也溶于甲醇，DMSO，DMF等有機(jī)溶劑，標(biāo)記反應(yīng)也可以在純有機(jī)溶劑中進(jìn)行。如需脂溶性Cy3.5染料，可選擇普通花青素（cyanine），即Cy3.5-NHS活化酯( D10011 )。磺化Cy3.5-NHS標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是591nm/604nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Texas Red?，Alexa Fluor 594, BODIPY? TR, DyLight 594等。

注意事項(xiàng):

NHS活化酯基團(tuán)對(duì)濕度比較敏感，務(wù)必干燥保存產(chǎn)品。使用前產(chǎn)品需放到室溫回溫至少20分鐘。

使用不含氨基的緩沖體系。比如磷酸鈉緩沖液（PBS），Hepes緩沖液，碳酸氫鈉緩沖液；或硼酸緩沖液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的緩沖液，比如Tris，甘氨酸等，它們會(huì)和Cy3.5上的伯胺競(jìng)爭(zhēng)。高濃度咪唑(imidazole)也會(huì)影響反應(yīng)。

標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下，因?yàn)榇蟛糠譄晒饣衔镌趶?qiáng)光下長(zhǎng)時(shí)間照射會(huì)緩慢光漂白(photobleaching)。