"GL261:小鼠膠質(zhì)瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

TE5細胞類似產(chǎn)品：：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞

DH82細胞類似產(chǎn)品：：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞

ECC10細胞類似產(chǎn)品：：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞

Colo205細胞類似產(chǎn)品：：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

GL261:小鼠膠質(zhì)瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

J774 A.1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞

MADB106細胞類似產(chǎn)品：：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞

NuTu 19細胞類似產(chǎn)品：：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

GL261:小鼠膠質(zhì)瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

RH7777細胞類似產(chǎn)品：：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞

SL-29細胞類似產(chǎn)品：：MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞

KMH2細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞

KU812-F細胞類似產(chǎn)品：：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞

PL45細胞類似產(chǎn)品：：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞

H841細胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞

CHO K1細胞類似產(chǎn)品：：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞

LL/2 (LLC1)細胞類似產(chǎn)品：：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞

GDM-1細胞類似產(chǎn)品：：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞

A549/ATCC細胞類似產(chǎn)品：：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞

G-402細胞類似產(chǎn)品：：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞

Malme-3 M細胞類似產(chǎn)品：：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞

293-GP細胞類似產(chǎn)品：：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞

SJRH 30細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞

SUDHL-2細胞類似產(chǎn)品：：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞

NTERA2D1細胞類似產(chǎn)品：：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞

NTERA2D1細胞類似產(chǎn)品：：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞

HL-60 clone15細胞類似產(chǎn)品：：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞

870細胞類似產(chǎn)品：：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞

End1/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞

EL-4細胞類似產(chǎn)品：：NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞

COLO 320HSR細胞類似產(chǎn)品：：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

SP2/0 Ag-14細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞

TK 10細胞類似產(chǎn)品：：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞

GL261:小鼠膠質(zhì)瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

PG-4細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞

PLA-802細胞類似產(chǎn)品：：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞

PLA-802細胞類似產(chǎn)品：：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞

253J-BV細胞類似產(chǎn)品：：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞

OE-21細胞類似產(chǎn)品：：Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞

Strain L-929細胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞

CL1細胞類似產(chǎn)品：：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞

Cor L88細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞

D283 Med細胞類似產(chǎn)品：：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞

HEC-251細胞類似產(chǎn)品：：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞

SW-1573細胞類似產(chǎn)品：：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞

A375mel細胞類似產(chǎn)品：：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞

Normal Rat, August 3, 1983細胞類似產(chǎn)品：：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞

CNE2Z細胞類似產(chǎn)品：：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞

PC-3M-2B4細胞類似產(chǎn)品：：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞

GM06141細胞類似產(chǎn)品：：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞

SKMEL2細胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞

H-1915細胞類似產(chǎn)品：：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞

HCC 94細胞類似產(chǎn)品：：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞

RGM1細胞類似產(chǎn)品：：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞

UPCI-SCC090細胞類似產(chǎn)品：：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞

Ly8細胞類似產(chǎn)品：：Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞

TSCC1細胞類似產(chǎn)品：：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞

MDAMB175VII細胞類似產(chǎn)品：：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞

H-522細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞

SNU-449細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞

IOSE29細胞類似產(chǎn)品：：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞

Case 3細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞

Dakiki細胞類似產(chǎn)品：：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞

OSRC2細胞類似產(chǎn)品：：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞

NCI-H1882細胞類似產(chǎn)品：：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞

H1770細胞類似產(chǎn)品：：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞

KLN205細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞

NCIH1436細胞類似產(chǎn)品：：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞

BT549細胞類似產(chǎn)品：：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞

Y3-Ag 1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：0V-1063細胞、KYSE-180細胞、SH-SY5Y細胞

CCC-HHM-2細胞類似產(chǎn)品：：CL40細胞、SK MEL 5細胞、HCC-1588細胞

KM-H2細胞類似產(chǎn)品：：HMC-1細胞、SUDHL4細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞

SK-Hep1細胞類似產(chǎn)品：：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞

hFOB 1.19細胞類似產(chǎn)品：：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞

Detroit 562細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL6細胞、PaTu 8988s細胞、Hs746T細胞

SK-RC-42細胞類似產(chǎn)品：：LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞

Kit-225-K6細胞類似產(chǎn)品：：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE-8.1/2細胞

OCI-Ly10細胞類似產(chǎn)品：：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞

MDAMB436細胞類似產(chǎn)品：：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞

RTE細胞類似產(chǎn)品：：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞

HBSMC細胞類似產(chǎn)品：：Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞

SVEC4-10細胞類似產(chǎn)品：：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞

LIPF178C細胞類似產(chǎn)品：：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞

OCI-Ly7細胞類似產(chǎn)品：：NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞

Rabbit Kidney 13細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞

Hs895T細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞

HGF-1細胞類似產(chǎn)品：：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞

HCC-1599細胞類似產(chǎn)品：：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞

L-1210細胞類似產(chǎn)品：：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞

OCIAML2細胞類似產(chǎn)品：：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞

SW 982細胞類似產(chǎn)品：：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞

VAESBJ細胞類似產(chǎn)品：：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞

VAESBJ細胞類似產(chǎn)品：：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞

LM(TK-)細胞類似產(chǎn)品：：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞

Kato-III細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞

HCC-4006細胞類似產(chǎn)品：：SNU869細胞、H-841細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞

SKG-3a細胞類似產(chǎn)品：：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞

Eph4 1424細胞類似產(chǎn)品：：HDMEC細胞、RBMVEC細胞、LC-2-Ad細胞

SNU-423細胞類似產(chǎn)品：：CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞

KM12 SM細胞類似產(chǎn)品：：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞

H-1404細胞類似產(chǎn)品：：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞

TKB1細胞類似產(chǎn)品：：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞

NOR10細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞

CMK細胞類似產(chǎn)品：：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞

EOMA細胞類似產(chǎn)品：：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞

H2106細胞類似產(chǎn)品：：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞

McA-RH8994細胞類似產(chǎn)品：：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞

3T3-442A細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞

MDA 231-LM2-4175細胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞

P3/NS1/1-Ag4.1細胞類似產(chǎn)品：：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞

N-Tera-2細胞類似產(chǎn)品：：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞

SaOS-2細胞類似產(chǎn)品：：A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞

MDA-231細胞類似產(chǎn)品：：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞

OCI-AML3細胞類似產(chǎn)品：：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞

Hep 3B細胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞

HNSC細胞類似產(chǎn)品：：HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞

GL261:小鼠膠質(zhì)瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

H187細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞

NCIH1341細胞類似產(chǎn)品：：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞

UC-3細胞類似產(chǎn)品：：HCFB（HCF）細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞

CV 1細胞類似產(chǎn)品：：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞

CMT-167細胞類似產(chǎn)品：：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞

EFO 27細胞類似產(chǎn)品：：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞

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