超敏型化學發(fā)光液(Super ECL)
一、產(chǎn)品簡介。
本產(chǎn)品是超敏型 ECL,可以檢測到飛克級濃度的蛋白,常用于 western blot 實驗中表達水平較低的蛋白檢測。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運輸,4 ℃避光保存,有效期 12 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本產(chǎn)品主要用于表達水平較低的蛋白檢測,可以檢測到飛克級濃度的蛋白。
2. 本產(chǎn)品特異性強,背景干凈清晰。
四、使用說明(western blot 顯影)。
1. Western blot 實驗中孵育完一抗和二抗的 PVDF 膜用 TBST 洗滌 3 次,備用。
2. Super ECL 工作液配制:根據(jù) PVDF 膜的大小,估算需要的 Super ECL 工作液體積,將試劑盒中的 A 液與 B 液等體積混合,制備 Super ECL 工作液。
3. Super ECL 工作液孵育。將 PVDF 膜自 TBST 溶液中取出,用吸水紙吸去多余液體,置于化學發(fā)光儀顯影用的底板上,滴加 Super ECL 工作液,使其覆蓋均勻,室溫孵育 1-2 min。
4. 顯影。將載有 PVDF 膜的底板放入化學發(fā)光儀,開啟化學發(fā)光檢測程序,檢測不同時間點的熒光強度。
5. 若利用 X 感光片顯影,則將孵育完 Super ECL 的 PVDF 膜置于新的保鮮膜上,包裹妥當,置于暗盒內(nèi),壓上 X 感光片,曝光一段時間后取出 X 光片,依次放入顯影液和定影液,顯影。
五、注意事項。
1. 本產(chǎn)品一般不用于檢測表達水平較高的蛋白,以免熒光強度過高導致背景較深。
2. 吸取 A 液和 B 液的過程中必須更換槍頭,否則導致二者相互污染,檢測效果減弱,最終失效。
3. 請蓋緊 A 液與 B 液的瓶蓋,特別是 B 液,含有氧化劑,易被還原而失效。
4. Super ECL 孵育 2 min 后即可檢測,并盡量在 30 min 內(nèi)檢測完畢,以免熒光衰減導致實驗失敗。
5. NaN3(疊氮化鈉)能抑制辣根過氧化物酶的活性,二抗孵育過程中應避免使用 NaN3。
6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關鍵字: 超敏型化學發(fā)光液;Super ECL;
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