化學發(fā)光液（ECL）試劑盒
一、產(chǎn)品簡介。
增強型化學發(fā)光試劑（Enhanced Chemiluminescence，ECL）由 A 液和 B 液組成，二者混合后氧化生成辣根過氧化物酶底物，在辣根過氧化物酶的催化作用下產(chǎn)生熒光，且熒光強度與辣根過氧化物酶的含量成正比，常用于 western blot 等實驗。
二、運輸與存儲條件。
本產(chǎn)品低溫運輸，4 ℃避光保存，有效期 12 個月。
三、特點與優(yōu)勢。
1. 本試劑可以檢測到皮克級濃度的蛋白，且背景清晰。
2. 本試劑主要用于中高表達豐度的蛋白檢測，經(jīng)濟實惠。
四、使用說明（western blot 顯影）。
1. Western blot 實驗中孵育完一抗和二抗的 PVDF 膜用 TBST 洗滌 3 次，備用。
2. ECL 工作液配制：根據(jù) PVDF 膜的大小，估算需要的 ECL 工作液體積，將試劑盒中的 A 液與B 液等體積混合，制備 ECL 工作液。
3. ECL 工作液孵育。將 PVDF 膜自 TBST 溶液中取出，用吸水紙吸去過多的液體，置于化學發(fā)光儀的底板上，滴加 ECL 工作液，使其覆蓋均勻，室溫孵育 1-2 min。
4. 顯影。將載有 PVDF 膜的底板放入化學發(fā)光儀，開啟化學發(fā)光檢測程序，檢測不同時間點的熒光強度。
5. 若利用 X 感光片顯影，則將孵育完 ECL 的 PVDF 膜置于新的保鮮膜上，包裹妥當，置于暗盒內(nèi)，壓上 X 感光片，曝光一段時間后取出 X 光片，依次放入顯影液和定影液，顯影。
五、注意事項。
1. 過度曝光會導致蛋白間差異消失，請選擇合適的曝光時間。
2. 吸取 A 液和 B 液的過程中必須更換槍頭，否則導致二者相互污染，檢測效果減弱，最終失效。
3. 請蓋緊 A 液與 B 液的瓶蓋，特別是 B 液，含有氧化劑，易被還原而失效。
4. ECL 孵育 2 min 后即可檢，并盡量在 30 min 內(nèi)檢測完畢，以免熒光衰減導致實驗失敗。
5. NaN3（疊氮化鈉）能抑制辣根過氧化物酶的活性，二抗孵育過程中應避免使用 NaN3。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
關(guān)鍵字： 化學發(fā)光液試劑盒 ;ECL;
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