"KP-N-NS:人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

B16BL6細胞類似產(chǎn)品：：HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞

H4IIE細胞類似產(chǎn)品：：H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞

CV1細胞類似產(chǎn)品：：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞

WM-266-mel細胞類似產(chǎn)品：：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：源自腦轉(zhuǎn)移灶的腎上腺神經(jīng)母細胞瘤。

KP-N-NS:人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

H23細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞

SuDHL 5細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞

NS1-Ag4/1細胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

KP-N-NS:人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過GAO時，易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化，對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化，細胞密度過GAO超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細胞碎片增多，黑渣子增多，細胞會成片脫落，嚴重影響細胞活性，并有部分細胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下，反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓，記錄Zui佳消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞類似產(chǎn)品：：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞

AAV293細胞類似產(chǎn)品：：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞

HOP-62細胞類似產(chǎn)品：：LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞

P-2003細胞類似產(chǎn)品：：SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞

MFE-296細胞類似產(chǎn)品：：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞

P-388D1細胞類似產(chǎn)品：：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞

NPA'87細胞類似產(chǎn)品：：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞

H-209細胞類似產(chǎn)品：：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞

L-6細胞類似產(chǎn)品：：L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞

HEC-251細胞類似產(chǎn)品：：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞

SJRH30細胞類似產(chǎn)品：：HMEL細胞、SKOV3細胞、WEHI 164 TC細胞

MyLa 2059細胞類似產(chǎn)品：：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞

H-2330細胞類似產(chǎn)品：：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞

PK-136細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞

TE9細胞類似產(chǎn)品：：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞

VM-CUB1細胞類似產(chǎn)品：：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞

VM-CUB1細胞類似產(chǎn)品：：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞

H-1781細胞類似產(chǎn)品：：RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞

MG-63細胞類似產(chǎn)品：：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞

NIH3T3細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞

DHBE細胞類似產(chǎn)品：：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞

SKNBE2細胞類似產(chǎn)品：：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞

UT-7細胞類似產(chǎn)品：：HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞

H22細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞

KP-N-NS:人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

b.End3細胞類似產(chǎn)品：：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞

NALM-6細胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞

HFB細胞類似產(chǎn)品：：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞

A375SM細胞類似產(chǎn)品：：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞

TE-15細胞類似產(chǎn)品：：MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞類似產(chǎn)品：：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞

SNU-C1細胞類似產(chǎn)品：：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞

HUT 28細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞

WRL68細胞類似產(chǎn)品：：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞

H711細胞類似產(chǎn)品：：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞

RLE-6TN細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

Tn 5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞

SKO3細胞類似產(chǎn)品：：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞

BC-022細胞類似產(chǎn)品：：EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞

FRTL-5細胞類似產(chǎn)品：：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞

DHL-5細胞類似產(chǎn)品：：KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞

T-CAM2細胞類似產(chǎn)品：：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞

HMVEC細胞類似產(chǎn)品：：NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞

NCIH1876細胞類似產(chǎn)品：：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞

SCI1細胞類似產(chǎn)品：：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞

A375-SM細胞類似產(chǎn)品：：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞

EMT-6細胞類似產(chǎn)品：：CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞

WSUDLCL2細胞類似產(chǎn)品：：CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞

GM03569D細胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞

BEL 7405細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞

WI38細胞類似產(chǎn)品：：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞

LN 229細胞類似產(chǎn)品：：RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞

H740細胞類似產(chǎn)品：：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞

HFT 8810細胞類似產(chǎn)品：：CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞

S3 HeLa細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞

CLONE M3細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞

Karpas299細胞類似產(chǎn)品：：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞

NU-GC-4細胞類似產(chǎn)品：：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞

MDCK II細胞類似產(chǎn)品：：SC1細胞、G-292細胞、130 T細胞

FDCP-1細胞類似產(chǎn)品：：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞

PC3M-2B4細胞類似產(chǎn)品：：COLO684細胞、Line 522細胞、22Rv-1細胞

LAN-5細胞類似產(chǎn)品：：GA-10細胞、MCM細胞、ETCC007細胞

HOP 92細胞類似產(chǎn)品：：WiDr/S細胞、HOP 62細胞、Hs 888.Lu細胞

LM8細胞類似產(chǎn)品：：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞

CCRF-CEM/S細胞類似產(chǎn)品：：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞

SKMES1細胞類似產(chǎn)品：：MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞

UPCI-SCC-90細胞類似產(chǎn)品：：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞

SK Mel 1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞

Bac1 2F5細胞類似產(chǎn)品：：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞

MES13細胞類似產(chǎn)品：：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞

EL 4細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞

REC 1細胞類似產(chǎn)品：：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞

HT55細胞類似產(chǎn)品：：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞

GM03570細胞類似產(chǎn)品：：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞

STTG1細胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞

SF-295細胞類似產(chǎn)品：：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞

JIMT1細胞類似產(chǎn)品：：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞

L-02細胞類似產(chǎn)品：：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞

H-23細胞類似產(chǎn)品：：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞

NCI-HUT-596細胞類似產(chǎn)品：：675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞

SR細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞

KRC Y細胞類似產(chǎn)品：：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞

NW38細胞類似產(chǎn)品：：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞

NW38細胞類似產(chǎn)品：：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞

SK HEP-1細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞

C 643細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞

ML2細胞類似產(chǎn)品：：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞

PA-1細胞類似產(chǎn)品：：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞

Pa18C細胞類似產(chǎn)品：：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞

Mono Mac6細胞類似產(chǎn)品：：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞

EFM-192B細胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞

SUDHL-8細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞

SUM-52-PE細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞

MDCC-MSB1細胞類似產(chǎn)品：：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞

Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞類似產(chǎn)品：：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞

CA 46細胞類似產(chǎn)品：：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞

Jurkat 77細胞類似產(chǎn)品：：QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞

P3J-HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞

MO59J細胞類似產(chǎn)品：：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞

Sf-21細胞類似產(chǎn)品：：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞

CHOS細胞類似產(chǎn)品：：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞

Ramos.2G6.4C10細胞類似產(chǎn)品：：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞

EB1細胞類似產(chǎn)品：：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞

138 MG細胞類似產(chǎn)品：：HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞

P3JHR-1細胞類似產(chǎn)品：：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞

NCIH1694細胞類似產(chǎn)品：：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞

NCIH1618細胞類似產(chǎn)品：：CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞

KP-N-NS:人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

CCD 19Lu細胞類似產(chǎn)品：：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞

A72細胞類似產(chǎn)品：：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞

GM04154B細胞類似產(chǎn)品：：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞

NCIH69細胞類似產(chǎn)品：：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞

HPF細胞類似產(chǎn)品：：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞

McA-RH 8994細胞類似產(chǎn)品：：A-375細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞、SCL II細胞

"