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細胞生長：貼壁

有一些細胞是數(shù)量多一點比較HAO生長，生長狀態(tài)也比較HAO。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較HAO，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較HAO。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不HAO的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不HAO，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得HAO的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Colo699細胞類似產品：：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞

NK 10a細胞類似產品：：NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞

Monomac-1細胞類似產品：：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞

NCI-H2342細胞類似產品：：174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

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細胞形態(tài)：上皮細胞樣

V79-GalK1細胞類似產品：：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞

HGBEC細胞類似產品：：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞

KM.12細胞類似產品：：HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１０^４ cells/ml

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

傳代24h-48h處于對數(shù)期的細胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細胞沉淀；用血清重懸細胞沉淀，用血球計數(shù)板或者細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù)；配制細胞凍存液，將凍存液加到細胞液中，吹打混勻，控制細胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細胞懸液按照1ml/支分裝至已標記HAO的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過夜后將凍存細胞移至液氮中長期保存。凍存管內細胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細胞凍存和復蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。細胞凍存時細胞狀態(tài)不佳，會嚴重影響復蘇時細胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存，凍存前一天細胞ZuiHAO進行換液；消化過度也會嚴重影響細胞凍存后復蘇的活率；凍存細胞時為按照溫度梯度進行操作，會嚴重影響細胞活率。

BXPC3細胞類似產品：：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞

KS-SLK細胞類似產品：：SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞

Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞類似產品：：NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞

Hut292細胞類似產品：：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞

2T細胞類似產品：：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞

JM-1細胞類似產品：：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞

hFOB細胞類似產品：：H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞

U118MG細胞類似產品：：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞

JOSK-M細胞類似產品：：SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞

PJ34細胞類似產品：：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞

A253細胞類似產品：：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞

KBM-7細胞類似產品：：KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞

MCF.10A細胞類似產品：：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞

HSC6細胞類似產品：：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞

COLO 679細胞類似產品：：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞

SW.620細胞類似產品：：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞

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RPMI7666細胞類似產品：：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞

A549/ATCC細胞類似產品：：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞

CAL-78細胞類似產品：：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞

Madison細胞類似產品：：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞

HepG2/C3A細胞類似產品：：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞

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CLONE M3細胞類似產品：：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞

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aTC1-6細胞類似產品：：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞

H1703細胞類似產品：：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞

WSU-DLCL(2)細胞類似產品：：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞

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NCI-H2141細胞類似產品：：KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞

CAL 12細胞類似產品：：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞

SU-DHL-1細胞類似產品：：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞

RD-ES細胞類似產品：：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞

Ku812細胞類似產品：：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞

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OE-33細胞類似產品：：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞

H-2196細胞類似產品：：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞

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BNL-CL.2細胞類似產品：：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞

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HCC1588細胞類似產品：：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞

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MM134細胞類似產品：：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞

MuM-2C細胞類似產品：：Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞

E304細胞類似產品：：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞

NCI-H838細胞類似產品：：hTERT-RPE-1細胞、R1610細胞、Okayama University Medical School-23細胞

SW-620細胞類似產品：：COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞

HSC2細胞類似產品：：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞

Huh7.5.1細胞類似產品：：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞

UO-31細胞類似產品：：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞

COR-L 105細胞類似產品：：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞

SNU739細胞類似產品：：CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞

U2-OS細胞類似產品：：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞

NMC-G1細胞類似產品：：MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞

SW-1573細胞類似產品：：MDBK (NBL-1)細胞、X63.Ag8.653細胞、SNU182細胞

Hos TE-85細胞類似產品：：MS1細胞、293-FT細胞、OC-316細胞

Human Corneal Endothelial Cells-12細胞類似產品：：SGC-7901/DDP細胞、RPMI-7951細胞、RIN14B細胞

A-2780細胞類似產品：：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞

Panc 4.03細胞類似產品：：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞

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L-WRN細胞類似產品：：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞

LL2細胞類似產品：：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞

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TE 671細胞類似產品：：SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞

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SR786細胞類似產品：：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞

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Y3M細胞類似產品：：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞

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L-M (TK-)細胞類似產品：：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞

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NUGC-4細胞類似產品：：WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞

L-cell細胞類似產品：：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞

MZCRC1細胞類似產品：：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞

OVCAR-8細胞類似產品：：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞

NCIH1568細胞類似產品：：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞

NCTC 929細胞類似產品：：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞

YAC-1細胞類似產品：：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞

TOV112細胞類似產品：：SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞

Huh7.5細胞類似產品：：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞

COLO-HSR細胞類似產品：：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞

HCC-9204細胞類似產品：：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞

TE-7細胞類似產品：：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞

SHIN-3細胞類似產品：：Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞

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OVCA433細胞類似產品：：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞

HOS/MNNG細胞類似產品：：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞

Ca9-22細胞類似產品：：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞

C3H/10T1/2 clone 8細胞類似產品：：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞

OSC19細胞類似產品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

KMS-26細胞類似產品：：ARH-77細胞、H-2110細胞、HME1細胞

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