1.簡介
CM SepFast HighRes是一組弱陽離子交換介質(zhì)。CM SepFast HighRes專為生物分子的高分辨率純化而設(shè)計，其中不純的成分很難通過普通的生物處理層析介質(zhì)分離。
CM SepFast HighRes在配體密度、負載量和單個組分的分離能力之間進行了平衡設(shè)計，適用于大規(guī)模生物制造應(yīng)用。
CM SepFast HighRes的基礎(chǔ)基質(zhì)由高度交聯(lián)的較小尺寸(20 - 50 µm)的瓊脂糖珠制成，具有出色的流動性。它對生物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學(xué)條件都非常穩(wěn)定。
- 產(chǎn)品特性
表1 CM SepFast HighRes的特性
*測試條件：10 mM緩沖液 pH 7.5，上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì)，停留時間5分鐘，50%穿透。
3.方法優(yōu)化
建議在載量、流速、結(jié)合pH值、結(jié)合離子強度、洗脫速度和梯度等參數(shù)之間進行篩選。由于CM SepFast HighRes的快速孔隙可及性，結(jié)合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得分離能力。
強離子交換介質(zhì)可以在較寬的pH范圍內(nèi)保持其電荷（并因此保持其功能），而弱離子交換介質(zhì)的離解程度和離子交換容量隨pH值而變化。因此，如果使用弱離子交換介質(zhì)，優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。
通常在優(yōu)化方法時，平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外，對于不穩(wěn)定或對剪切力敏感分子的純化，需要優(yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對目標(biāo)分子可能造成的損害。
4.裝柱
CM SepFast HighRes由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成，具有出色的機械強度。該介質(zhì)可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達3 bar。
5.保養(yǎng)
根據(jù)不同的應(yīng)用，介質(zhì)可能會被多次使用。如需重復(fù)使用，請參閱以下說明。
（1）再生
每次運行后，用高離子強度溶液（例如1M NaCl緩沖液）或增加pH 值。
（2）就地清洗 (CIP)
CIP是一種去除強結(jié)合物質(zhì)的程序，例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內(nèi)毒素和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止污染物在填充床中積聚，并有助于保持色譜柱性能。
應(yīng)根據(jù)存在的污染物類型為每個過程制定具體的 CIP程序。CIP 的頻率取決于各個應(yīng)用的性質(zhì)。
以下信息可作為一般指導(dǎo)：濃度高達2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結(jié)合的雜質(zhì)。疏水性結(jié)合的污染物可以通過以下試劑去除：1 M NaOH、低比例的非離子洗滌劑（例如0.1-2%）、堿性或酸性條件下的30% 異丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述試劑的組合。一般來說，孵育時間應(yīng)該更長（例如從 30 min到2 h），以確保污染物完全解離。
（3）消毒
建議使用0.5?1.0 M NaOH接觸1 h進行消毒。
6.儲存
CM SepFast HighRes應(yīng)儲存在20%乙醇中（強陽離子交換介質(zhì)含有0.2 M NaAC）以防止微生物生長。將介質(zhì)存儲在4℃到30℃的溫度下。使用前，用至少5體積的運行緩沖液來平衡介質(zhì)。
7.更多信息
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8.訂購信息
