成人免费xx,国产又黄又湿又刺激不卡网站,成人性视频app菠萝网站,色天天天天

優(yōu)惠券使用說明>

暫無可領(lǐng)優(yōu)惠券

上海晶風(fēng)生物科技有限公司

主營產(chǎn)品:細(xì)胞,原代細(xì)胞,完全培養(yǎng)基,Elisa試劑盒,PCR試劑盒

客服熱線:17301805756 17301805756

  • 電話:17301805756 17301805756
  • 郵箱:69787182@qq.com
  • 網(wǎng)址:https://www.atccer.com
  • 國籍:中國
  • 地址:青浦區(qū)朱家角鎮(zhèn)康業(yè)路388弄1-14號4幢一層
  • 點擊這里給我發(fā)消息
  • 企業(yè)認(rèn)證:
  • CB指數(shù):58
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞MCA-205操作方法
發(fā)布日期:2024/12/13 7:58:11發(fā)布人:上海晶風(fēng)生物科技有限公司

小鼠纖維肉瘤細(xì)胞MCA-205

培養(yǎng)說明書

一、細(xì)胞培養(yǎng)條件

細(xì)胞名稱

MCA-205小鼠纖維肉瘤細(xì)胞

生長特性

貼壁生長

凍存條件

無血清凍存液(貨號:C7001)

培養(yǎng)體系

1640+10%FBS

傳代方法

第一次建議1:2傳代 

傳代情況

2天換液

備注

用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡對比培養(yǎng)

如果對比培養(yǎng)效果不好,建議直接購買我們的完全培養(yǎng)基

二、細(xì)胞收到后處理

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基,以便進(jìn)行對比培養(yǎng)

 

三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟

a、細(xì)胞傳代如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)傳代具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)重懸。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

b、細(xì)胞凍存:

1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;

3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。

4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱 存放24小時以上轉(zhuǎn)入液氮罐中。

  1. 細(xì)胞復(fù)蘇:
  1. 從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
  2. 將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
  3. 棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種T25培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
  4. 第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

 

  • 注意事項:有些細(xì)胞比較特殊,如貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

 

、售后條款:

1)細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?

1. 細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);

2. 細(xì)胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);

3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);

4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);

5. 細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實后予重發(fā);

6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。

2細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?

1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);

2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);

6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);

7. 視具體情況而定。 

 


相關(guān)新聞資訊
  • 2024/12/25
    古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實時熒光PCR法) 使用說明書 【產(chǎn)品名稱】 通用名稱:古典豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒(實時熒光PCR法) 英文名稱:Classieal Swine Fever virus Detection Kit (Real-Time PCR Method) 【包裝規(guī)格】50T/盒 【預(yù)期用途】 本試劑盒適用于古典豬瘟病毒檢測,可用
  • 2024/12/25
    本試劑盒僅供研究使用。 檢測范圍: 96T 2pg/mL-90pg/mL 使用目的: 本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中淀粉樣蛋白1-42(A1-42)含量。 實驗原理 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠淀粉樣蛋白1-42(A1-42)水平。用純化的小鼠淀粉樣蛋白1-42(A1-42)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入淀粉樣蛋白1-42(A1-
  • 2024/12/23
    大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞DRG 培養(yǎng)說明書 一、細(xì)胞培養(yǎng)條件 ▼▲ 細(xì)胞名稱 大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞DRG 生長特性 貼壁生長 凍存條件 無血清凍存液(貨號:C7001)

查看更多

商家暫時不對外公布

主頁 | 企業(yè)會員服務(wù) | 廣告業(yè)務(wù) | 聯(lián)系我們 | 舊版入口 | 中文MSDS | CAS Index | 常用化學(xué)品CAS列表 | 化工產(chǎn)品目錄 | 新產(chǎn)品列表 | 評選活動| HS海關(guān)編碼
Copyright © 2008 ChemicalBook 京ICP備07040585號  京公網(wǎng)安備 11010802032676號  All rights reserved.
熱線電話:400-158-6606