2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1），作為一種重要的生物化學(xué)探針，在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)以及毒理學(xué)研究中發(fā)揮著不可或缺的作用。這種化合物以其獨特的物理化學(xué)性質(zhì)和生物活性，成為測定細胞內(nèi)活性氧（ROS）含量的有力工具，并廣泛應(yīng)用于細胞凋亡、細胞增殖及細胞毒性等復(fù)雜生物過程的研究中。

2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1）物理化學(xué)性質(zhì)

首先，讓我們從2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯的基本物理化學(xué)性質(zhì)入手。該化合物具有灰白色晶體粉末的外觀，其分子式為C24H14Cl2O7，分子量達到485.27 g/mol。在標準大氣壓（760 mmHg）下，其沸點高達657.9°C，熔點則位于232-234°C之間。這些特性確保了該化合物在常規(guī)實驗條件下的穩(wěn)定性。此外，其密度為1.59 g/cm³，閃點為239.2°C，折射率為1.692，這些參數(shù)對于理解其在溶液中的行為及與其他分子的相互作用至關(guān)重要。

值得注意的是，2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯對光和水敏感，因此在儲存時需要特別小心。建議將其密封儲存在陰涼、干燥的庫房中，避免陽光直射，遠離腐蝕區(qū)，以確保其長期穩(wěn)定性。

2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1）生物活性與用途

作為一種細胞通透性熒光探針，2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（常簡稱為DCFH-DA）能夠迅速滲透細胞膜，并在細胞內(nèi)被酯酶水解為非熒光的二氯熒光素（DCFH）。隨后，在細胞內(nèi)ROS的作用下，DCFH被氧化成高度熒光的2′,7′-二氯熒光素（DCF），其激發(fā)/發(fā)射光譜為492/515nm，這一特性使得通過熒光顯微鏡或流式細胞儀等儀器輕松檢測細胞內(nèi)ROS水平成為可能。

2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1）測定細胞內(nèi)活性氧含量

細胞內(nèi)ROS的生成與多種生理和病理過程密切相關(guān)，包括細胞信號傳導(dǎo)、免疫反應(yīng)、細胞凋亡等。因此，準確測定細胞內(nèi)ROS水平對于理解這些過程至關(guān)重要。DCFH-DA的應(yīng)用使得研究人員能夠在不破壞細胞完整性的前提下，實時監(jiān)測細胞內(nèi)ROS的動態(tài)變化，從而揭示其在不同生物過程中的具體作用機制。

2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1）細胞凋亡研究

細胞凋亡是細胞程序性死亡的一種形式，對于維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定至關(guān)重要。研究表明，細胞凋亡過程中往往伴隨著ROS水平的顯著升高。通過DCFH-DA探針，研究人員可以直觀地觀察到細胞凋亡過程中ROS的時空變化，進而探討其與細胞凋亡之間的內(nèi)在聯(lián)系。此外，結(jié)合其他凋亡相關(guān)指標的檢測，可以進一步闡明細胞凋亡的分子機制。

2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1）細胞增殖與細胞毒性評估

細胞增殖是生物體生長、發(fā)育和修復(fù)損傷的基礎(chǔ)。而細胞毒性則是藥物研發(fā)、環(huán)境污染物監(jiān)測等領(lǐng)域需要重點關(guān)注的問題。DCFH-DA探針在評估細胞增殖和細胞毒性方面也顯示出巨大的潛力。通過檢測不同條件下細胞內(nèi)ROS水平的變化，可以間接反映細胞增殖能力和對外部刺激的響應(yīng)能力。同時，結(jié)合細胞存活率、細胞形態(tài)學(xué)變化等指標的綜合分析，可以更加全面地評估藥物或污染物的細胞毒性效應(yīng)。

2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯（CAS號：2044-85-1）實際應(yīng)用案例

在藥物研發(fā)領(lǐng)域，DCFH-DA探針被廣泛應(yīng)用于抗氧化劑、抗癌藥物等的篩選和評估中。通過檢測藥物處理后細胞內(nèi)ROS水平的變化，可以初步判斷藥物是否具有抗氧化或促氧化作用，進而評估其潛在的藥理活性和安全性。此外，在環(huán)境科學(xué)研究中，DCFH-DA探針也被用于監(jiān)測水體、土壤等環(huán)境介質(zhì)中污染物的細胞毒性效應(yīng)，為環(huán)境保護和污染治理提供科學(xué)依據(jù)。

結(jié)論

綜上所述，2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯作為一種高效、靈敏的細胞通透性熒光探針，在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)及毒理學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用前景。其獨特的物理化學(xué)性質(zhì)和生物活性使得研究人員能夠方便地監(jiān)測細胞內(nèi)ROS水平的變化，進而深入探討ROS在細胞凋亡、細胞增殖及細胞毒性等生物過程中的作用機制。隨著研究的不斷深入和技術(shù)的不斷發(fā)展，相信DCFH-DA探針將在更多領(lǐng)域發(fā)揮重要作用，為人類的健康和環(huán)境保護事業(yè)貢獻更多力量。