什么是PIPES緩沖液
PIPESBuffer(CAS5625-37-6)化學(xué)全名為1,4-哌嗪二乙磺酸,是一種兩性離子生物緩沖液。常溫下為白色粉末固體。PIPESBuffer不易溶于水(1g/L(100°C)。通過混合等摩爾鈉鹽溶液滴定至合適的pH值即可溶解。例如PIPESDisodiumSaltBuffer(CAS76836-02-7)和PIPES倍半鈉鹽(CAS100037-69-2)。
PIPESBuffer的應(yīng)用
PIPESBuffer廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)、色譜、化妝品、診斷測(cè)試、蛋白質(zhì)純化和電子顯微鏡研究。PIPESBuffer類似于MESBuffer和MOPSBuffer,這種Good'sBuffer缺乏與大多數(shù)金屬離子形成絡(luò)合物的能力,因此建議用作金屬離子溶液中的非配位緩沖液。
PIPESBuffer的優(yōu)勢(shì)
根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn),使用NaOH-PIPES緩沖的戊二醛溶液在各種組織的超微結(jié)構(gòu)方面,如人體皮膚、人體肥厚性瘢痕、軟體動(dòng)物神經(jīng)元組織等,結(jié)果表明可以觀察更多的細(xì)胞器和細(xì)胞器之間的細(xì)節(jié)。細(xì)胞質(zhì)在一致性上更均勻。與NaOH-PIPES緩沖相比,微絲和微管在PIPES組織中更常見。此外,PIPESBuffer被證明在活細(xì)胞中具有可比性。
什么是TRICINE緩沖液
TRICINEBuffer(N-tris(Hydroxymethyl)methylglycine,CASNo.5704-04-1),一種含有胺基和酸基的兩性離子生物緩沖液。本品為白色結(jié)晶性粉末,微溶于水(溶解度為1.8g/100ml水)。
TRICINEBuffer的應(yīng)用
TRICINE廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)和電泳研究。作為細(xì)胞培養(yǎng)研究的緩沖液,TRICINE能夠抑制動(dòng)物組織培養(yǎng)中支原體的意外生長。它也已用于細(xì)菌培養(yǎng)基中以防止鐵鹽沉淀。該Good's緩沖液能夠與大多數(shù)金屬離子形成絡(luò)合物,例如Mg、Ca、Co、Cu、Ni和Zn,因此在選擇該緩沖液時(shí)應(yīng)考慮穩(wěn)定性常數(shù)和濃度。作為電泳研究的緩沖液,Tricine已被用作利用受控物質(zhì)巴比妥的協(xié)議的替代品。
TRICINE Buffer的優(yōu)勢(shì)
TRICINE具有比甘氨酸更高的負(fù)(更負(fù))電荷,使其遷移速度更快。此外,它的高離子強(qiáng)度導(dǎo)致更多的離子運(yùn)動(dòng)和更少的蛋白質(zhì)運(yùn)動(dòng),這樣就可以在較低百分比的丙烯酰胺凝膠中分離低分子量蛋白質(zhì)。已證明Tricine可用于通過電泳分離1至100kDa范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)。在使用螢火蟲熒光素酶進(jìn)行ATP測(cè)定的十種測(cè)試中,發(fā)現(xiàn)25mmol/L的tricine緩沖液是zui有效的緩沖液。