通過(guò)固相法合成得到組氨瑞林。
用二(對(duì)甲基苯基)甲胺為樹(shù)脂，并用過(guò)量3倍的BOC和二環(huán)已基碳化二亞胺(DCC)作為致活劑，在二氯甲烷中反應(yīng)2h，使BOC保護(hù)的甘氨酸和樹(shù)脂偶合。然后連上下一個(gè)氨基酸，洗滌，脫保護(hù)。按下列操作連上下一個(gè)氨基酸。
| 步驟 | 試劑和操作 | 混合時(shí)間/min | | 1 | 二氯甲烷洗(2×80ml) | 3 | | 2 | 甲醇洗(2×30m1) | 3 | | 3 | 二氯甲烷洗(3×80m1) | 3 | | 4 | 50%三氟乙酸和5%1，2-乙二硫醇在70ml二氯甲烷的溶液(2次) | 10 | | 5 | 二氯甲烷洗(2×80rnl) | 3 | | 6 | 用12.5%三乙胺在70ml二氯甲烷溶液洗2次 | 5 | | 7 | 甲醇洗(2×40m1) | 2 | | 8 | 二氯甲烷洗(3×80rnl) | 3 | | 9 | 加入10mmolBOC保護(hù)的氨基酸溶液30ml二甲基甲酰胺或二氯甲烷+10mmolDCC的二氯甲烷溶液 | 30-300 | | 10 | 甲醇洗(2×40m1) | 3 | | 11 | 用12.5%三乙胺在70ml二氯甲烷的溶液洗 | 3 | | 12 | 甲醇洗(2×30m1) | 3 | | 13 | 二氯甲烷洗(2×80ml) | 3 |
在步驟13后，取小部分作茚三酮試驗(yàn)。如果試驗(yàn)為陰性，再?gòu)牡?步開(kāi)始接上下一個(gè)氨基酸；如果試驗(yàn)為陽(yáng)性或略顯陽(yáng)性，再重復(fù)第9到第13步。當(dāng)全部氨基酸接上后，加入苯甲醚，再在0℃加入氫氟酸，即可使產(chǎn)物從樹(shù)脂上脫下，并脫去保護(hù)基。減壓除去氟化氫，用0.1%的乙酸萃取除去樹(shù)脂，冷凍得到粗品。粗品可用離子交換樹(shù)脂提純。 |