背景及概述^[1][2]

迷迭香酸甲酯是迷迭香酸的衍生物，廣泛存在于冬凌草、黃荊、南丹參、溪 黃草和紫蘇等植物中，與迷迭香酸的不同主要在于側(cè)鏈羧基酯化。迷迭香酸甲酯的藥理活性研究表明，在體外抗炎、抗菌、抗氧化和抗心血管平滑肌細(xì)胞增殖等實(shí)驗(yàn)中，迷迭香酸甲酯的活性強(qiáng)于迷迭香酸。

含量測(cè)定^[1]

丁麗敏等人建立了一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的LC-MS/MS法,對(duì)不同中藥材中迷迭香酸甲酯及迷迭香酸的含量進(jìn)行定量。通過(guò)單因素考察法建立了樣品提取方法:向0. 1 g藥材粉末中加入25 m L 50%甲醇,超聲15 min進(jìn)行提取.以0. 1%甲酸-水和0. 1%甲酸-乙腈為流動(dòng)相,流速為300μL/min,采用Waters BEH C18柱(2. 1×50 mm,1. 7μm)進(jìn)行梯度洗脫,柱溫為40℃,使用電噴霧離子源,在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式下采用負(fù)離子掃描檢測(cè)。迷迭香酸甲酯和迷迭香酸在線(xiàn)性范圍0. 1～100 ng/m L (r=0. 999)和0. 1～500 ng/ml (r=0. 999)內(nèi),線(xiàn)性關(guān)系良好,重復(fù)性、日內(nèi)和日間精密度的RSD <5%,加樣回收率在90%～110%范圍內(nèi),且RSD <5%,可用于迷迭香酸甲酯和迷迭香酸在植物中的含量測(cè)定。

藥理作用^[2-4]

龐磊等人用迷迭香酸甲酯(MR)梯度處理人胃癌細(xì)胞系SGC-7901和AGS細(xì)胞24h后,采用CCK-8法測(cè)定細(xì)胞的增殖活性;應(yīng)用劃痕試驗(yàn)觀(guān)察細(xì)胞遷移能力的變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)胃癌細(xì)胞的凋亡率;Western blot檢測(cè)LC3蛋白水平,探討MR對(duì)人胃癌細(xì)胞系SGC-7901和AGS細(xì)胞的增殖、遷移和凋亡的影響以及其與LC3蛋白的關(guān)系。結(jié)果表明:MR對(duì)人胃癌細(xì)胞系SGC-7901和AGS細(xì)胞增殖和遷移能力有明顯抑制作用,且能夠誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;同時(shí)MR能提高LC3蛋白水平。這一研究提示MR可顯著抑制人胃癌細(xì)胞的增殖和遷移能力,同時(shí)可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能與LC3蛋白水平上調(diào)有關(guān)。

王小洪等人探討了迷迭香酸甲酯對(duì)帕金森病小鼠多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用。方法 C57/BL6雄性小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)以建立帕金森病模型后,行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)運(yùn)動(dòng)功能、爬桿時(shí)間、平衡協(xié)調(diào)能力、懸掛能力,生化方法檢測(cè)中腦黑質(zhì)區(qū)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽-過(guò)氧化物酶(GSHPx)水平,免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)紋狀體區(qū)酪氨酸羥化酶(TH)陽(yáng)性纖維、激活星形膠質(zhì)細(xì)胞的量,Western Blot法檢測(cè)紋狀體區(qū)TH、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(i NOS)水平。結(jié)果注射迷迭香酸甲酯后,小鼠在10 min內(nèi)的運(yùn)行距離增加,滾筒實(shí)驗(yàn)的停留期增加,爬桿時(shí)間降低,懸掛能力提高,黑質(zhì)區(qū)多巴胺(DA)及其代謝產(chǎn)物高香草酸(HVA)和3,4-二羥基苯乙酸(DOPAC)的水平升高,腦組織SOD、GSH-Px酶活性升高,而MDA水平降低,小鼠紋狀體區(qū)TH陽(yáng)性纖維量顯著升高,i NOS水平下降。結(jié)論迷迭香酸甲酯可有效抑制帕金森病小鼠黑質(zhì)紋狀體通路的損傷,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制腦內(nèi)氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)來(lái)調(diào)節(jié)MPTP誘導(dǎo)的多巴胺能神經(jīng)元損傷。

王小洪等人采用腦內(nèi)定位注射6-羥基多巴胺(6-OHDA)建立帕金森病小鼠模型,以阿樸嗎啡誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)圈試驗(yàn)、轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)檢測(cè)小鼠的運(yùn)動(dòng)功能,免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)各組小鼠紋狀體區(qū)TH陽(yáng)性纖維的量,以化學(xué)比色法測(cè)定小鼠腦內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)及丙二醛(MDA)活性水平,以Western-blot檢測(cè)小鼠紋狀體區(qū)SOD1、SOD2和Nrf2水平,q-PCR檢測(cè)各組腦內(nèi)NQO1、Sod1、Sod2、Cat和Gpx1水平。結(jié)果表明:迷迭香酸甲酯可顯著減少阿樸嗎啡誘導(dǎo)的PD小鼠旋轉(zhuǎn)圈數(shù)量,增加PD小鼠在轉(zhuǎn)棒上的停留時(shí)間、紋狀體區(qū)TH陽(yáng)性纖維量及SOD1、SOD2和Nrf2的蛋白水平。結(jié)果提示迷迭香酸甲酯對(duì)6-OHDA誘導(dǎo)的PD小鼠多巴胺能神經(jīng)元損傷有顯著的保護(hù)作用,其可能通過(guò)抑制腦內(nèi)氧化應(yīng)激水平而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

主要參考資料

[1] 丁麗敏,劉茜茜,蘇超男,鞏釗,劉榮霞.不同藥材中迷迭香酸甲酯及迷迭香酸的含量測(cè)定[J].煙臺(tái)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與工程版),2019,32(02):124-128.

[2] 龐磊,曹桂云,吳凡,王小洪,周芳超,王方方,李斐,鄧彬,丁巖冰,郁多男.迷迭香酸甲酯誘導(dǎo)自噬抑制人胃癌細(xì)胞增殖的研究[J].揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2018,39(03):26-30+36.

[3] 王小洪,曹桂云,王晴,徐瑾業(yè),李穎,王繼軍,郁多男.迷迭香酸甲酯對(duì)帕金森病小鼠多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用[J].中成藥,2018,40(05):1156-1159.

[4] 王小洪,丁冬怡,孫志穎,楊子坤,潘思華,曹桂云.迷迭香酸甲酯對(duì)6-OHDA所致腦內(nèi)氧化損傷的影響[J].揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版),2017,38(04):30-34.