背景及概述^[1][2]

Tris-glycine-SDS電泳緩沖液(1X粉劑) 又叫Tris-甘氨酸電泳緩沖液，用作生物科技領(lǐng)域內(nèi)的單鏈抗體制備用試劑。Tris-甘氨酸電泳緩沖液（pH8.3）由15.1g Tris堿、94g甘氨酸、900mL純水和50mL 10%SDS溶液制成。蛋白變性和非變性電泳檢測在蛋白的生物化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)中，具有重要地位，是蛋白質(zhì)量和濃度檢測的常規(guī)方法之一，是分析蛋白片段大小、質(zhì)量濃度和純度的重要依據(jù)。常規(guī)的蛋白電泳經(jīng)常使用Tris堿-甘氨酸體系，并在變性電泳緩沖液中，添加SDS變性劑，在非變性電泳中不加變性劑。

制備舉例^[1]

而傳統(tǒng)的蛋白電泳緩沖液的制備需要實(shí)驗(yàn)工作人員自主完成，包括稱量多項(xiàng)藥品、準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值、適當(dāng)稀釋緩沖液等多項(xiàng)步驟。配制過程耗時耗力，且pH值調(diào)節(jié)過程增加了實(shí)驗(yàn)時間和誤差，不利于蛋白電泳實(shí)驗(yàn)的快速開展。

CN201810338064.0提供了一種供蛋白變性和非變性電泳使用的緩沖液預(yù)制試粉，無需稱量步驟，無需pH值調(diào)節(jié)，僅需取一至幾份封裝在塑料容器或袋中的預(yù)制試粉，與一定體積的去離子水混合，即可制得固定濃度和pH值(8.3±0.1)的蛋白電泳緩沖液，減輕了緩沖液配制的人力，提高了緩沖液制備的效率和準(zhǔn)確性。

其組成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)濃度的緩沖液，每份預(yù)制試粉含有3.02g的Tris堿、18.8g的甘氨酸、1g的SDS、0.68-0.72g的KHPO。由此配制的電泳緩沖液中各組成成分的濃度為：Tris堿25mmol/L、甘氨酸250mmol/L、SDS3.5mmol/L，KHPO 5.0-5.3mmol/L，pH值穩(wěn)定在8.3±0.1之間。試粉中所有物料均完全混合，以散粉或壓片形式，儲存或封裝在塑料容器或袋中。

使用方法如下：在室溫下，將每一份的試粉與1L去離子水充分混合互溶，即得到1L 1×濃度的電泳緩沖液。此過程無需稱量試粉，無需調(diào)節(jié)緩沖液pH值，通過與一定體積的去離子水混合互溶，快速制備固定濃度、固定pH值的變性或非變性的蛋白電泳緩沖液。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

(1)本發(fā)明的預(yù)制試粉的使用方法簡便快速，使得緩沖液的制備過程可在5-10分鐘內(nèi)完成，提高蛋白電泳實(shí)驗(yàn)的整體效率。

(2)本發(fā)明試粉所制備的緩沖液，具有較長的電泳壽命和較好的蛋白穩(wěn)定性，在連續(xù)電泳10小時以上的電泳槽中，正負(fù)極的pH值變化不超過3％，蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定不被降解。

主要參考資料

[1] CN201710771995.5單鏈抗體制備用試劑

[2] CN201810338064.0 一種快速制備蛋白變性或非變性電泳緩沖液的預(yù)制試粉及其使用方法