藏木香為菊科旋覆花屬植物，主要分布在我國四川、青海、甘肅及西藏等地，以根入藥，是藏醫(yī)、蒙醫(yī)常用藥材。藏木香性溫，味甘、辛、苦，具有行氣鎮(zhèn)痛、調(diào)氣解郁、健脾消食、止痛安胎的功效，主要用于胸肋、脘腹脹痛、慢性胃炎、胎動不安等病癥。藏木香中含有多種化學(xué)成分，研究表明土木香內(nèi)酯(alantolactone,1)和異土木香內(nèi)酯(isoalantolactone,2)是其主要活性成分，具有顯著的抗炎、保肝、抑菌和調(diào)節(jié)心臟機(jī)能等作用。其含量的高低直接影響藏木香的質(zhì)量與療效。

高純度的對照品是藥材鑒別和質(zhì)量評價的前提條件。目前尚未見關(guān)于土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯對照品制備方法的報(bào)道。本試驗(yàn)主要考察了二者的制備方法。由于土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯雙鍵位置的差異，與Ag⁺形成配合物的牢固程度不同，可采用Ag⁺絡(luò)合柱色譜法初步分離兩者，然后通過制備型HPLC法進(jìn)行快速純化，從而得到純度較高的土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯對照品。

制備方法

1、對照品粗品的制備

取干燥的藏木香根莖藥材適量，用粉碎機(jī)粉碎，過2號篩，得粉末。以石油醚浸泡過夜，過濾，濾液濃縮成稠膏狀，以凍干機(jī)凍干，得到淡黃色粉末。取該粉末適量,按樣品與硅膠(含有0.25%硝酸銀)1:50的比例裝柱，以苯:石油醚:乙酸乙酯(15:3:3)進(jìn)行洗脫，TLC法檢查，10%硫酸乙醇顯色，收集與目標(biāo)化合物具有相同R_f值的藍(lán)色斑點(diǎn)部分，濃縮，即得土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的粗品。經(jīng)過HPLC檢測，采用外標(biāo)法，測得土木香內(nèi)酯含量為35.8%，異土木香內(nèi)酯含量為40.4%。

2、對照品的色譜分離條件

2.1、分析型液相色譜條件

色譜柱Welchrom C₁₈柱(4.6mm×250mm，5um)；流動相乙腈:0.1%磷酸(60:40)；流速1.0ml/min；柱溫：25℃；檢測波長194nm；進(jìn)樣量10ul。

2.2、制備型液相色譜條件

色譜柱DAC-HB50 C1動態(tài)軸向壓縮柱(50mm×450mm，10um)；流動相乙腈:0.1%磷酸(55:45)；流速50ml/min；柱溫25℃；檢測波長194nm；進(jìn)樣量2ml。

3、溶液配制

對照品溶液：分別精密稱取土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯對照品14.26和14.38mg，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，配成濃度為1.426和1.438mg/ml的混合溶液，經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾后備用。

供試品溶液：稱取粗品土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯適量，用甲醇溶解，配制成濃度約40mg/ml的溶液，用0.2um微孔濾膜過濾即得。

4、對照品的分離純化

取供試品溶液按上述制備型色譜條件制備，所得色譜圖如下圖。分別收集圖中土木香內(nèi)酯1部分(32~35min)和異土木香內(nèi)酯2部分(25~29min)?；厥杖軇┖蟮猛聊鞠銉?nèi)酯和異土木香內(nèi)酯。分別精密稱取所得土木香內(nèi)酯2.01mg和異土木香內(nèi)酯2.15mg，置10ml量瓶中，用甲醇溶解并定容，分別配成濃度為0.201和0.215mg/ml的溶液。經(jīng)0.45um微孔濾膜過濾后備用。按分析型色譜條件測定，以外標(biāo)法計(jì)算，測得土木香內(nèi)酯純度為99.1%，異土木香內(nèi)酯純度為99.4%。

參考文獻(xiàn)

[1]張新新,楊洋,劉勝家,等. 藏木香中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的制備[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,2014,45(2):116-119.