核酸電泳緩沖液的作用與分類

核酸電泳是分子生物學(xué)研究中的一項(xiàng)基本技術(shù)，用于分離和分析DNA或RNA分子。TBE、TAE和MOPS緩沖液是核酸電泳中最常用的緩沖系統(tǒng)，它們各自具有獨(dú)特的特性和應(yīng)用場景。

TBE緩沖液：由Tris、硼酸和EDTA組成，具有較高的緩沖能力，適合于小分子DNA片段的分離。TBE的高緩沖能力有助于維持電泳過程中pH值的穩(wěn)定，從而提高分辨率。

TAE緩沖液：與TBE相比，TAE的緩沖能力較弱，但其配制更為簡便，成本較低。TAE適合于大分子DNA片段的電泳分析，以及需要進(jìn)行后續(xù)酶促反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)。

MOPS緩沖液：MOPS是一種有機(jī)磺酸類化合物，具有良好的水溶性和穩(wěn)定性。MOPS緩沖液在RNA電泳中的應(yīng)用尤為重要，因?yàn)樗苡行Х乐筊NA的降解和變性，提高RNA分子的分離效果。

配制方法

TAE緩沖液

MOPS緩沖液

實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常將TAE配制成10× 或者 50× 的儲(chǔ)液，實(shí)驗(yàn)前稀釋儲(chǔ)液到1×的工作液。 

1x TAE 緩沖液的成分是：

40 mM Tris (pH 7.6)

20 mM acetic acid

1 mM EDTA

50x TAE儲(chǔ)液配制方法：

將Tris(FW=121) 242g，100 ml 0.5 M EDTA， 57.1 ml的冰醋酸溶解在600 ml的去離子水中；而后調(diào)節(jié)pH至8.3，加去離子水定容至1L后，室溫保存。使用時(shí)稀釋50倍 即為1×TAE Buffer。

TBE緩沖液

TBE緩沖液可以配置成 5× 或者 10×的儲(chǔ)液。

1x TBE 緩沖液的成分是：

89 mM Tris (pH 7.6)

89 mM boric acid

2 mM EDTA

10x TBE 儲(chǔ)液配制方法：

將Tris（FW=121）108g，硼酸（FW=61.8）55g，40 ml 0.5 M EDTA 溶解在600 ml的去離子水中；而后調(diào)節(jié)pH至8.3，加去離子水定容至1L后，室溫保存。使用時(shí)稀釋10倍 即為1×TBE Buffer。

MOPS緩沖液

10× MOPS緩沖液的成分是：

200 mM MOPS

20 mM NaOAc

10 mM EDTA

41.8 g MOPS溶于DEP℃水；

10× MOPS緩沖液儲(chǔ)液配制方法：

用2 N NaOH調(diào)節(jié)至pH7.0，量取20mL1 M NaOAc(DEPC處理)，20 mL 0.5 M EDTA(pH8.0)(DEPC處理)；加DEPC水定容至1L,0.45μm濾膜除雜，室溫避光保存。