背景^[1-3]

人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)Elisa試劑盒是用于檢測人樣本（如血清、血漿、組織勻漿等）中人髓系細胞觸發(fā)受體-1表達水平的實驗工具。以下是對該試劑盒的詳細介紹：

人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)Elisa試劑盒

一、基本信息

產(chǎn)品名稱：人髓系細胞觸發(fā)受體-1（TREM-1）ELISA試劑盒

用途：主要用于科研實驗，檢測人樣本中人髓系細胞觸發(fā)受體-1的含量，不得用于臨床診斷或其他非科研用途。

保存條件：一般建議存儲于2-8℃的冷藏環(huán)境中，以確保試劑的穩(wěn)定性和活性。

保質(zhì)期：通常為6個月，具體以產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。

規(guī)格：常見的有48T和96T兩種規(guī)格，分別代表試劑盒可進行48次和96次檢測。不同規(guī)格和供應(yīng)商的價格可能有所不同。

二、產(chǎn)品特點

高靈敏度與特異性：采用先進的ELISA技術(shù)，能夠高靈敏度、特異性地檢測人樣本中的人髓系細胞觸發(fā)受體-1。

操作簡便：試劑盒通常包含完整的試劑組分和詳細的操作說明書，用戶只需按照說明書步驟操作即可完成實驗。

穩(wěn)定性好：試劑盒中的組分經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保實驗的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

三、操作步驟

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜,37℃反應(yīng)60分鐘。

3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液）100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

注意事項

在使用前請仔細閱讀產(chǎn)品說明書，了解試劑盒的規(guī)格、保存條件、操作步驟及注意事項等信息。

實驗過程中應(yīng)注意無菌操作，避免交叉污染。

樣本采集后應(yīng)盡早進行提取和實驗，如需保存，請按照說明書要求選擇合適的保存條件。

實驗結(jié)果僅供參考，具體結(jié)論需結(jié)合其他實驗數(shù)據(jù)和臨床信息綜合判斷。

應(yīng)用^[4][5]

人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)Elisa試劑盒可以用于TREM-1基因多態(tài)性及血清sTREM-1與冠心病易感性的相關(guān)性

髓系細胞觸發(fā)受體-1（TREM-1）為TREM家族成員之一,是一種免疫球蛋白超家族活化受體,其在體內(nèi)的存在方式包括膜結(jié)合型（TREM-1）和可溶型（sTREM-1）。TREM-1可通過與DNAX激活蛋白12（DAP12）發(fā)生偶聯(lián),觸發(fā)下游信號通路級聯(lián)反應(yīng),增強核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）活性并促進NF-κBP50/P65亞單位入核,啟動炎性因子表達,在動脈粥樣硬化中發(fā)揮重要作用,故其基因有可能為冠心病的易感基因。

目的:探討TREM-1基因多態(tài)性（rs2234237及rs9471535）及血清sTREM-1與冠心病的關(guān)系,分析TREM-1基因多態(tài)性（rs2234237及rs9471535）對血清sTREM-1表達的影響。

方法:采用病例對照研究方法。選擇120例冠心病患者作為冠心病組,根據(jù)美國心臟病學(xué)會/美國心臟協(xié)會基金會（ACCF/AHA）,將冠心病組分為兩個亞組（亞型）,包括17例SAP患者、103例ACS患者。同期選取90例健康人作為對照組。采用Sanger法對所有受試者TREM-1基因（rs2234237及rs9471535）單核苷酸多態(tài)性（SNPs）分析,采用人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)Elisa試劑盒酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清sTREM-1水平。應(yīng)用SPSS23.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析。比較各組基線臨床資料和基因型及等位基因分布頻率。非條件Logistic回歸分析TREM-1基因（rs2234237及rs9471535）多態(tài)性與冠心病及其亞型易感性的關(guān)系。相關(guān)性分析TREM-1基因多態(tài)性（rs2234237及rs9471535）及血清sTREM-1與冠心病嚴(yán)重程度的相關(guān)性。分別比較rs2234237及rs9471535多態(tài)性位點各基因型間血清sTREM-1水平,分析TREM-1基因（rs2234237及rs9471535）多態(tài)性對血清sTREM-1表達的影響。

人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)Elisa試劑盒結(jié)果:1.冠心病組吸煙、高血壓、糖尿病與血脂異常比例及空腹血糖（FBG）水平顯著高于對照組（P<0.05）,而高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平顯著低于對照組（P<0.05）。在冠心病亞組中,SAP組高血壓比例及年齡水平顯著高于對照組（P<0.05）。冠心病亞組中的ACS組吸煙、高血壓、糖尿病、血脂異常比例及FBG、甘油三酯（TG）水平顯著高于對照組（P<0.05）,而HDL-C水平顯著低于對照組（P<0.05）。

參考文獻

[1]Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation[J].Melanie Salvermoser;;Robert Pick;;Ludwig T.Weckbach;;Annette Zehrer;;Phillip Lohr;;Maik Drechsler;;Markus Sperandio;;Oliver Soehnlein;;Barbara Walzog.Blood,2018(17)

[2]The Interplay of Lipids,Lipoproteins,and Immunity in Atherosclerosis.[J].Pirillo Angela;;Bonacina Fabrizia;;Norata Giuseppe Danilo;;Catapano Alberico Luigi.Current atherosclerosis reports,2018

[3]Emerging Associations Between Neutrophils,Atherosclerosis,and Psoriasis[J].G.E.Sanda;;A.D.Belur;;H.L.Teague;;Nehal N.Mehta.Current Atherosclerosis Reports,2017(12)

[4]Application of Single-Nucleotide Polymorphism-Related Risk Estimates in Identification of Increased Genetic Susceptibility to Cardiovascular Diseases:A Literature Review.[J].Fiatal Szilvia;;ádány Róza.Frontiers in public health,2017

[5]陸嬌.TREM-1基因多態(tài)性及血清sTREM-1與冠心病易感性的相關(guān)性[D].長江大學(xué),2018.