背景^[1-3]

人熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒是一種用于檢測人血清或血漿中熱休克蛋白90(HSP-90)水平的生化試劑盒。熱休克蛋白90是一種分子伴侶蛋白，參與調節(jié)多種細胞功能，包括蛋白質折疊、穩(wěn)定性和降解等。在生物體內，HSP-90的表達水平受到多種因素的影響，如應激、炎癥、腫瘤等。

ELISA試劑盒通過特異性抗體與待測樣本中的HSP-90結合，形成抗原-抗體復合物。然后，通過酶標記的二抗與抗原-抗體復合物結合，產生可測量的信號。通過測量信號強度，可以計算出樣本中HSP-90的濃度。

人熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷，如腫瘤標志物檢測、心血管疾病風險評估、神經退行性疾病研究等。此外，該試劑盒還可用于藥物研發(fā)和治療效果評估等領域。

人熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒

人熱休克蛋白90（HSP-90）ELISA試劑盒是一種用于檢測生物樣本中HSP-90蛋白水平的實驗室工具。以下是關于該試劑盒的詳細介紹：

一、基本信息

名稱：人熱休克蛋白90（HSP-90）ELISA試劑盒

英文名稱：Human Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit

用途：主要用于科研實驗，不得用于臨床診斷或決策

保存條件：一般建議保存在2-8℃的環(huán)境中，以保持試劑的穩(wěn)定性和活性

二、產品規(guī)格與價格

不同供應商提供的人熱休克蛋白90（HSP-90）ELISA試劑盒規(guī)格和價格可能有所不同。一般來說，常見的規(guī)格包括96孔板和48孔板，價格范圍從幾百元到數(shù)千元不等。具體價格需要根據(jù)供應商、訂購數(shù)量以及市場情況等因素確定。

三、適應物種與樣本類型

適應物種：人，部分試劑盒還適用于大鼠、小鼠等其他物種（具體需參考試劑盒說明書）

樣本類型：包括血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液等多種生物樣本類型。具體可檢測的樣本類型需根據(jù)試劑盒說明書確定。

四、檢測方法

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）是檢測人熱休克蛋白90（HSP-90）的常用方法。該方法基于抗原與抗體之間的特異性結合反應，通過酶催化底物產生顏色變化來定量或定性檢測樣本中的HSP-90蛋白水平。

五、操作步驟

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜,37℃反應60分鐘。

3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液）100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

應用^[4][5]

人熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒可以用于扇貝免疫相關因子基因的克隆與表達分析

本研究采取大規(guī)模的EST測序方法，結合cDNA末端快速擴增技術，直接從cDNA文庫中分離、克隆獲得了6個免疫防御相關因子基因的全長cDNA序列和6個免疫防御相關因子基因的部分序列。

獲得了櫛孔扇貝熱休克蛋白90的全長cDNA序列和蝦夷扇貝熱休克蛋白90含3′末端在內的部分序列。櫛孔扇貝熱休克蛋90分子量為83.04kD，也屬于酸性蛋白質。通過InterPro軟件分析發(fā)現(xiàn)，在該序列中存在熱休克蛋白90家族的簽名序列，在N末端存在典型的組氨酸激酶樣ATPase活性結構域。生物信息學分析表明，獲得的序列是熱休克蛋白90家族的成員。進一步的空間結構預測分析也表明，它的N端結構域和C端結構域的空間結構與人的熱休克蛋白90的空間結構高度相似。采用人熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒和RT-PCR技術研究櫛孔扇貝HSP90對于外界應激條件的反應，發(fā)現(xiàn)熱休克蛋白90對于環(huán)境中的脅迫因子PAH有明顯的反應，且HSP90 mRNA的表達量與刺激強度有明顯的依賴關系。但扇貝HSP90對大腸桿菌刺激的反應不明顯。此外，還獲得了櫛孔扇貝親環(huán)素A、海灣扇貝金屬硫蛋白基因的全長cDNA序列，以及櫛孔扇貝小熱休克蛋白，海灣扇貝肽聚糖識別蛋白，櫛孔扇貝超氧化物歧化酶，櫛孔扇貝清道夫受體蛋白基因的部分cDNA序列，并且對這些貝類免疫防御相關因子進行了全面的生物信息學分析。

參考文獻

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