概述
N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸（N-(p-Aminobenzoyl)glutamic acid）是一種分子式為C12H14N2O5，分子量270.2662的有機(jī)化學(xué)物質(zhì)。常溫常壓下，其性狀為白色結(jié)晶粉末，相對(duì)密度約為1.418 g/cm3。其他物理數(shù)據(jù)包括：熔點(diǎn)175℃，沸點(diǎn)607.1℃ at 760 mmHg，閃點(diǎn)320.9℃，折射率1.617。
應(yīng)用方面，N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸主要用作醫(yī)藥及染料中間體。例如，用1,1,3-三氯丙酮，N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸和2,4,5-三氨基-6-羥基嘧啶硫酸鹽反應(yīng)制得葉酸粗品，再經(jīng)酸析，堿精制得葉酸純品。制備葉酸粗品所得母液經(jīng)減壓蒸餾處理可得含1,1,3-三氯丙酮的水溶液，能循環(huán)套用10次以上，平均收率65.2%，含量97.8%～98.6%[1]。
合成方法
方法一
N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的制備包括以下步驟：準(zhǔn)備配置材料及試劑，選取味精(谷氨酸鈉>99%)，尿素，鹽酸，甲醇，磷酸，溴化鉀，氧化鋅，EDTA，乙酸，乙酸鈉，六次甲基四胺，二甲酚橙，色譜級(jí)甲醇，蒸餾水，超純水和N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸標(biāo)品。該N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的制備方法通過原料配比，溶劑水用量，微波功率，反應(yīng)時(shí)間四個(gè)反應(yīng)因素相分析獲得的最佳的微波合成N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的條件如下：水用量為0.3ml/mmol，微波功率為700W，反應(yīng)時(shí)間為14min等。在該反應(yīng)條件下N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的得率達(dá)到54.3%，在各因素中微波功率對(duì)反應(yīng)得率的影響效果顯著，達(dá)到了操作簡(jiǎn)單，收率高和成本較低的目的[2]。
方法二
另有文獻(xiàn)公開了另一種N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的制備方法，包括以下重量份數(shù)配比的原料：硝基苯甲酸5-10份，氯化亞砜10-15份，硝基苯甲酰氯2-4份，氨水8-10份，乙醇5-10份，水2-3份，谷氨基2-4份，氨基苯甲酰8-10份。該N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸通過硝基苯甲酸與氯化亞砜放置于反應(yīng)容器中加熱反應(yīng)制得[3]。
有關(guān)檢測(cè)
針對(duì)維生素凍干粉針劑中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的檢測(cè)，研究人員提供了一種色譜檢測(cè)法，包括如下步驟：(1)將N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸對(duì)照品溶于溶劑中，得到N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸對(duì)照品工作溶液，取兩份N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸對(duì)照品工作溶液注入液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)；(2)將樣品溶于溶劑中，得到供試品溶液,將供試品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算供試品溶液中的N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸含量。該發(fā)明突破性的建立了一種在注射用維生素凍干粉針劑中檢測(cè)維生素B9的雜質(zhì)N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的高效液相色譜分析方法，在基質(zhì)相當(dāng)復(fù)雜維生素凍干粉針劑產(chǎn)品中，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物的無干擾分離，并且同時(shí)具有方法簡(jiǎn)單，分析迅速，結(jié)果精確，響應(yīng)靈敏的特點(diǎn)[4]。
純度滴定
用高效液相色譜法，檢測(cè)原料N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸中對(duì)氨基苯甲酸，對(duì)硝基苯甲酸，N-對(duì)硝基苯甲酰-L-谷氨酸的含量。色譜柱：5μm 150 mm×4.6 mm C18，檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm，進(jìn)樣量：20μL，流速：1.2 mL/min，柱溫：40℃。結(jié)果表明，對(duì)氨基苯甲酸與N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的分離度為4.82，雜質(zhì)對(duì)氨基苯甲酸在0.01009~0.6054μg/mL(r=0.9997)，對(duì)硝基苯甲酸在0.025~0.6000μg/mL(r=0.9990)，N-對(duì)硝基苯甲酰-L-谷氨酸在0.027027~0.6006μg/mL(r=0.9998)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。該方法簡(jiǎn)便，靈敏，可靠，重復(fù)性好，可作為N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸中雜質(zhì)含量的控制方法[5]。
根據(jù)上述方法控制雜質(zhì)含量，繼而以重氮化滴定法對(duì)N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸樣品進(jìn)行純度分析。采用低溫和添加催化劑的條件下，利用重氮化反應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行快速滴定。滴定反應(yīng)終點(diǎn)采用永停滴定儀或者淀粉-KI試紙做外指示劑指示終點(diǎn)。經(jīng)回收率與精密度試驗(yàn)測(cè)試驗(yàn)證，分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠，測(cè)定N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸純度成本低廉[6]。
參考文獻(xiàn)
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[2]蔣信義,劉汝章,徐軍,等.一種N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的制備方法:CN201910839165.0[P].CN110627687A.
[3]張敏華,徐軍,等.一種N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的制備方法:CN201811133320.9[P].CN109053482A.
[4]廉卞卞,李蘋,林潔,等.維生素凍干粉針劑中N-(4-氨基苯甲酰)-L-谷氨酸的檢測(cè)方法:CN202110049562.5[P].CN112858511A.
[5]李煥君,王曉鳳,王莉莉,等.HPLC法測(cè)定N-對(duì)氨基苯甲酰-L-谷氨酸中雜質(zhì)含量[J].煤炭與化工, 2023, 46(4):139-142.
[6]郭建宇.N-對(duì)氨基苯甲酰-L-谷氨酸純度滴定分析方法:CN201010523254.3[P].CN101984354A.