背景^[1]

Caspase 是一個促細(xì)胞凋亡的含有半胱氨酸蛋白酶的家族，該家族在氨基酸序列、結(jié)構(gòu)及酶的特性上均相似，通常情況下以無活性的酶原形式存在于細(xì)胞中，酶原分子由3 部分組成，一個N 端前域及一大一小兩個亞基，酶原分子激活后，大小亞基解離并重新組裝為四聚體形式的活性酶。Caspase-9 是其中的一個成員，為一種促凋亡因子，并且是Caspase 家族中引起細(xì)胞凋亡的最關(guān)鍵成分之一。

而研究表明，凋亡是腫瘤發(fā)生的重要機(jī)制，凋亡通路的紊亂、促進(jìn)凋亡因子的抑制以及凋亡基因的表達(dá)失控，都會導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。Caspase-9 在腫瘤細(xì)胞的凋亡過程中發(fā)揮了重要的作用。Caspase-9 影響胃癌的具體機(jī)制尚不清楚，但應(yīng)與其促凋亡功能有關(guān)。Caspase 酶解底物包括Caspase 自身、PARP( 聚ADP-核糖聚合酶) 、IL-1β 前體、DNA 依賴的蛋白激酶( DNA-PK) 、PKCLaminA、Actin 及某些細(xì)胞因子。通過對這些底物的水解，Caspase 轉(zhuǎn)導(dǎo)凋亡信號或直接作為凋亡的效應(yīng)分子，促進(jìn)細(xì)胞骨架降解和DNA 片段化。

多數(shù)Caspase 正常以非活性的前體形式存在，即Caspase 酶原或Procaspase，酶原分子中的位點(diǎn)被天門冬氨酸蛋白酶切割后形成多聚體被激活。由于Caspase 可自我活化并能相互激活，因此凋亡過程一旦觸發(fā)，即呈級聯(lián)放大效應(yīng)。Caspase-9 位于級聯(lián)反應(yīng)上游，當(dāng)?shù)蛲銎鹗夹盘栕饔糜诰€粒體后，引起線粒體釋放細(xì)胞色C( cyt-c) ，接著cyt-c 與凋亡蛋白酶活化因子-1( Apaf-1) 結(jié)合并使Apaf -1 改變構(gòu)象形成八聚體，后者與Caspase-9 結(jié)合并誘導(dǎo)其發(fā)生自我催化，活化的Caspase-9 進(jìn)一步激活下游的Caspase，使級聯(lián)反應(yīng)進(jìn)一步放大，因此Caspase-9 是細(xì)胞線粒體依賴的凋亡途徑中重要起始因子。

Caspase-9抗體可以識別全長的Caspase-9(有時全長的Caspase-9也被稱作Procasepase-9或precursor)，也可以識別Caspase-9被剪切后產(chǎn)生的片段。使用 Caspase-9抗體 (Human Specific)，可以對未處理、用 staurosporine (1 µM) 或細(xì)胞色素 c (0.25 mg/ml) 處理的 HeLa 細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析，Caspase-9抗體還可對未處理或用細(xì)胞色素 c 處理的 Jurkat 細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。

主要參考資料

[1]  楊土英, 趙亞剛. 胃癌中 Livin 與 Caspase-9 關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 臨床軍醫(yī)雜志, 2012, 40(2): 484-487.