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14-3-3 gamma Rabbit Monoclonal Antibody

2020/10/25 9:01:40

背景[1][2]

單克隆抗體技術(shù)起源于Kohler等創(chuàng)建的體外鼠源雜交瘤技術(shù)。經(jīng)多年研究,鼠單抗已從單純的生物實(shí)驗(yàn)室科研及臨床診斷發(fā)展到治療性抗體藥物。但鼠單抗的主要缺陷是小鼠免疫系統(tǒng)不能識(shí)別某些免疫原,尤其是鼠源性的免疫原,而且鼠單抗的親和性不如兔來(lái)源抗體的親和性高。

然而由于沒(méi)有發(fā)現(xiàn)兔源性的漿細(xì)胞瘤及病毒體外轉(zhuǎn)染兔B細(xì)胞的技術(shù)困難,直到1995年在c-myc/v-abl轉(zhuǎn)基因兔身上成功地獲得了兔漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系,得到了穩(wěn)定的兔-兔雜交瘤,才使兔單克隆抗體技術(shù)有了突破性進(jìn)展。近年兔單克隆抗體技術(shù)日臻完善,目前商品化的兔單抗已達(dá)數(shù)千種。

14-3-3 蛋白在腦組織表達(dá)十分豐富,14-3-3gamma 蛋白主要在神經(jīng)元中表達(dá),它與許多蛋白結(jié)合,在細(xì)胞凋亡、生長(zhǎng)、增殖的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用,是細(xì)胞內(nèi)重要的保護(hù)性蛋白,但14-3-3 蛋白在缺血性神經(jīng)元中的作用還不清楚。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示14-3-3gamma 在局灶性腦缺血海馬及大腦皮質(zhì)的缺血周?chē)鷧^(qū)呈高表達(dá),可見(jiàn)核表達(dá)。

推測(cè)14-3-3gamma 表達(dá)上調(diào)及入核可能激活轉(zhuǎn)錄,從而影響凋亡,發(fā)揮其細(xì)胞保護(hù)作用。14-3-3gamma 在缺血的神經(jīng)元原代培養(yǎng)細(xì)胞中表達(dá)上調(diào),通過(guò)結(jié)合Bad 滯留在細(xì)胞質(zhì)中,從而阻止Bad 與Bcl2 /xl結(jié)合以及Bax 釋放,達(dá)到抑制凋亡作用。

最近有研究表明,14-3-3Tau 亞型能夠調(diào)節(jié)Beclin1 并參與了自噬過(guò)程。自噬是一個(gè)由溶酶體清除、降解細(xì)胞內(nèi)蛋白及細(xì)胞器的過(guò)程,自噬在缺血損傷中具有作用,但是否14-3-3gamma 參與自噬過(guò)程,還有待進(jìn)一步研究。14-3-3gamma兔單克隆抗體可用于分子印跡分析及 流式細(xì)胞儀等。注意14-3-3gamma兔單克隆抗體不適用于ICC/IF,IHC-P 或 IP。

應(yīng)用

1. 在生物標(biāo)記物開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用

兔單克隆抗體包括14-3-3gamma兔單克隆抗體廣泛用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,尤其在免疫組織化學(xué)以及檢測(cè)蛋白的轉(zhuǎn)譯后修飾方面具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。至今已有100多種兔單克隆抗體開(kāi)發(fā)用于癌癥的IHC臨床診斷與研究,其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC診斷試劑盒。在蛋白修飾研究領(lǐng)域,如蛋白的磷酸化,在與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)信號(hào)通路中起到了至關(guān)重要的作用,使用磷酸化蛋白的兔單克隆抗體可以非常清楚地顯示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多種磷酸化特異性的兔單克隆抗體面世。

2. 在治療抗體藥物開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用

臨床使用的大多數(shù)治療用抗體均需經(jīng)體外親和力成熟這一步驟,以提高抗體的親和力。這一過(guò)程常需8至12個(gè)月,最終親和力在納摩爾級(jí)(10-9 mol/L)。兔單抗不需使用體外親和力成熟,就能達(dá)到10-11至10-13 mol/L。這種高親和力不僅減少抗體的臨床使用量,還能減少由于使用大量抗體帶來(lái)的副作用。但這種高親和力的優(yōu)勢(shì)還需在動(dòng)物和臨床試驗(yàn)中進(jìn)一步證實(shí)。另外,與鼠單抗的人源化相比,

兔單克隆抗體的人源化更容易。因?yàn)椋脝慰寺】贵w主要由一種重鏈及輕鏈基因構(gòu)成,通過(guò)分析大量的兔單克隆抗體序列發(fā)現(xiàn),兔與人的抗體同源性更高,約60%~76%,而小鼠與人的抗體同源性略低,為57%~72%,說(shuō)明用兔單克隆抗體開(kāi)發(fā)藥物前景更廣闊。

主要參考資料

[1] 李婷婷,崔慧斐. 兔單克隆抗體的發(fā)展及應(yīng)用前景[J]. 食品與藥品,2012,14(9): 373-376.

[2] 孫紹騫, 于春艷, 劉玉和. 大鼠大腦局部腦缺血周?chē)鷧^(qū)海馬及大腦皮質(zhì) CLIC4 及 14-3-3gamma 蛋白的表達(dá)及其意義[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2012, 1: 048.

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