背景[1-3]
改良Y培養(yǎng)基用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌,成分(g/L)蛋白胨15.0;氯化鈉5.0;乳糖10.0;草酸鈉2.0;去氧膽酸鈉6.0;三號(hào)膽鹽5.0;丙酮酸鈉2.0;孟加拉紅0.04;水解酪蛋白5.0;瓊脂 17.0;pH值7.4±0.1,25℃。
檢驗(yàn)原理:
蛋白胨、水解酪蛋白在培養(yǎng)基中作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供菌體細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的氮源、碳源及生長(zhǎng)因子等;氯化鈉維持培養(yǎng)基體系滲透壓;乳糖作為可發(fā)酵的碳水化合物;三號(hào)膽鹽和去氧膽酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng);丙酮酸鈉和草酸鈉能促進(jìn)目標(biāo)菌生長(zhǎng);孟加拉紅作為著色劑;瓊脂作為凝固劑。
改良Y培養(yǎng)基
用法:稱取本品67.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,待冷至45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿。
直桿菌到球桿菌,直徑0.5~0.8μm,長(zhǎng)1~3μm。無(wú)芽孢。不形成莢膜,但在37℃生長(zhǎng)或來(lái)自體內(nèi)樣品的細(xì)胞中的鼠疫耶爾森氏菌(Y.pestis)能產(chǎn)生包被。革蘭氏陰性。37℃時(shí)不運(yùn)動(dòng)。生長(zhǎng)在30℃以下時(shí)以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)。
鼠疫耶爾森氏菌總是不運(yùn)動(dòng)。在普通的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上培養(yǎng)24h后,菌落半透明到不透明,直徑0.1~1.0mm。最適生長(zhǎng)溫度28~29℃。兼性厭氧,既具有呼吸型代謝又具有發(fā)酵型代謝。氧化酶陰性,接觸酶陽(yáng)性。除了個(gè)別的生物變型(biovars)外,都能還原硝酸鹽成亞硝酸鹽。
發(fā)酵葡萄糖和其他碳水化合物產(chǎn)酸,但不產(chǎn)氣或產(chǎn)少量的氣。表現(xiàn)特征常常與溫度有關(guān),一般培養(yǎng)在25~29℃比在37~39℃能呈現(xiàn)出更多的特征性。所研究過(guò)的種具有腸桿菌的常見(jiàn)抗原。生境很廣泛(從有生命到無(wú)生命),有些種適應(yīng)于特異性寄主。
應(yīng)用[4][5]
用于生豬屠宰過(guò)程中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的調(diào)查及預(yù)測(cè)模型的研究
從研究該菌的增菌分離方法入手,調(diào)查生豬屠宰過(guò)程中耶氏菌的流行分布情況,并應(yīng)用數(shù)學(xué)模型預(yù)測(cè)該菌在冷卻豬肉中的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài),為冷卻豬肉生產(chǎn)過(guò)程中更好地控制該菌提供有效的理論依據(jù)和技術(shù)手段。
1.生豬屠宰過(guò)程中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌分離方法的研究對(duì)屠宰場(chǎng)屠宰過(guò)程中豬的咽喉部位216份樣品感染耶氏菌進(jìn)行了分離鑒定,分別用改良磷酸鹽緩沖液(PBs)和氯化鎂孔雀綠肉湯(MM)兩種增菌方法,比較CIN-I、改良“Y”和MacConkey瓊脂培養(yǎng)基分離耶氏菌的效果。試驗(yàn)結(jié)果表明,PBS 26℃快速增菌30±2h后,使用CIN-Ⅰ分離瓊脂培養(yǎng)基可快速分離耶氏菌,提高該菌的檢出率,適合屠宰過(guò)程中耶氏菌的分離。
2.生豬屠宰過(guò)程中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的調(diào)查研究對(duì)不同屠宰生產(chǎn)工藝中豬咽喉部位及胴體表面感染的耶氏菌進(jìn)行調(diào)查研究,確定血清型分布情況及生物型別。結(jié)果表明,本次試驗(yàn)共檢出22株耶氏菌,為血清型O∶3,O∶8,O∶9和生物2、3型,均屬致病型菌株。該菌主要寄生在健康豬的咽喉部位,在不同屠宰工藝生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)豬胴體表面均有污染,其中燙毛工藝污染較為嚴(yán)重。
3.冷卻豬肉中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)模型的預(yù)測(cè)將特定的耶氏菌接種到無(wú)污染的冷卻豬肉表面,托盤(pán)包裝后分別在0、5、10和15℃溫度條件下貯藏,建立和驗(yàn)證了用于預(yù)測(cè)冷卻豬肉中耶氏菌生長(zhǎng)的動(dòng)力學(xué)模型。將不同溫度下得到的耶氏菌生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)值用于建立生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)模型,表明修正Gompertz方程能很好的描述耶氏菌在冷卻豬肉中的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)。