背景[1-3]
ANTI-BAD是可以特異性結(jié)合BAD的免疫抗體，主要用于檢測BAD的Western blotting、Immunohistocry、ELISA、IF、IHC-P、IHC-F等生物實驗。
Bad基因首先從鼠的cDNA文庫中克隆鑒定出，其后又克隆出人的同源基因，由Yang等于1995年發(fā)現(xiàn)，其編碼一個含204個氨基酸，分子質(zhì)量22-1×103的蛋白質(zhì)。雙雜交和序列分析發(fā)現(xiàn)，Bad可與Be1-2和Bd-xL結(jié)合形成異源二聚體，具有促進細胞凋亡作用，故名Bad(Bcl-xL/Bcl-2 associateddeath promoter)，它存在Bc1-2家族成員BH3同源結(jié)構(gòu)域和序列。
與Bax、Bak、Bc1-2相似，此結(jié)構(gòu)域是Bad與Bcl-2家族蛋白結(jié)合所必需的。Bad的促凋亡作用依賴于與Bel-2或Bc1-xL結(jié)合，胞外的Bad還能通過與一種細菌毒素的轉(zhuǎn)運結(jié)構(gòu)域結(jié)合進入細胞，誘導凋亡。Bad在某些病毒感染時還可與病毒受體結(jié)合，可能通過酪氨酸激酶途徑激活細胞凋亡。Bad是與BcI-xL和Bd-2相關(guān)的細胞死亡促進因子，是調(diào)控細胞凋亡的重要成員，主要通過線粒體途徑參與細胞凋亡。
在缺血性損傷，腫瘤發(fā)生和發(fā)展等多方面發(fā)揮調(diào)控細胞凋亡的作用，其促凋亡作用與其自身結(jié)構(gòu)特點和與其他Bc1-2家族成員的相互作用有關(guān)。應用其調(diào)控凋亡的作用，在缺血損傷中若從避免其去磷酸化人手阻斷Bad通路激活可達到抗凋亡目的或在腫瘤的治療中，促進其磷酸化來抑制細胞惡性化。
Bad在外周及中樞神經(jīng)元、淋巴細胞、骨髓造血細胞、生殖細胞及許多上皮細胞中均有表達。近年來其在缺血損傷方面的研究受到重視，腫瘤方面的研究多見。腦缺血后Bel-2基因家族在腦內(nèi)表達有明顯的改變，此方面的研究是新的熱點。
應用[4][5]
用于大鼠2型糖尿病后抑郁對海馬細胞凋亡和Bad、Bcl-xL的影響研究
通過分子水平干預糖尿病后抑郁的發(fā)生,提高糖尿病患者的生活質(zhì)量。采用高脂高糖飲食結(jié)合鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射法制作2型糖尿病模型,采用慢性不可預見溫和應激方法制作抑郁模型,采用高脂高糖飲食結(jié)合鏈脲佐菌素(STz)腹腔注射法和慢性不可預見溫和應激方法制作2型糖尿病后抑郁模型。
觀察糖尿病大鼠、抑郁大鼠及糖尿病合并抑郁大鼠的行為學改變,海馬細胞凋亡相關(guān)因子Bad,Bcl-xL表達以及海馬細胞凋亡形態(tài)學的改變,探探討2型糖尿病合并抑郁可能的發(fā)病機制。
方法：將50只成年健康雄性sD大鼠隨機分成實驗對照組(10只)、2型糖尿病組(15只)、單純抑郁組(10只)、2型糖尿病合并抑郁組(15只),以高脂高糖飲食加腹腔注射鏈尿佐菌素復制2型糖尿病大鼠模型,慢性不可預見溫和應激方法制作抑郁模型,兩者結(jié)合建立2型糖尿病后抑郁模型,觀察其體重、二便、飲食、血糖等一般情況,行曠場實驗及強迫游泳實驗對其進行行為學檢測。
通過HE染色觀察實驗各組大鼠腦海馬細胞形態(tài)學改變,用免疫組化法檢測各組大鼠海馬細胞Bad,Bcl-xL的表達,用TUNEL法檢測各組大腦海馬細胞凋亡情況,最后采用配對t檢驗；單因素方差分析,配對樣本t檢驗等統(tǒng)計學方法進行數(shù)據(jù)分析以及觀察腦組織的病理變化。
參考文獻
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