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ANTI-IL-12 P70抗體的應(yīng)用

2020/9/1 10:53:00

背景[1-3]

ANTI-IL-12 P70抗體是以ANTI-IL-12 P70為抗原制得的免疫抗體,可以特異性結(jié)合IL-12 P70。主要用于檢測IL-12 P70的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。白細胞介素-12(IL-12)是具有廣泛生物學活性的細胞因子,主要由激活的炎性細胞產(chǎn)生。

IL-12是一由p35和p40(IL-12β)兩條鏈組成的異源二聚體,兩個亞單位通過二硫鍵連接在一起,這種結(jié)構(gòu)在已發(fā)現(xiàn)的IL中所罕見。通常情況下,p40的量遠超出p70,在鼠中已觀察到p40同源二聚體的產(chǎn)生,是由轉(zhuǎn)染的細胞分泌的,p40同源二聚體沒有生物學活性,但它能和IL-12Rβ結(jié)合,與p70競爭性爭奪IL-12受體(IL-12R)而拮抗其生物學作用。單獨的p35不具有生物學活性,但卻是合成p70的限速因子。

天然IL-12(p70)具有獨特的異源二聚體結(jié)構(gòu),是由p40和p35兩個亞基通過二硫鍵共價連接而成的糖基化肽鏈〔相對分子質(zhì)量為(70~75)×103〕。IL-12 p35和p40基因定位于不同的染色體,各自受不同的啟動子和增強子調(diào)節(jié),按需生成有活性的p70或拮抗性p(40)2及單體p40?;钚孕问降腎L-12 p70需要兩條亞基共同表達,并以1∶1形式進行自然組合。

IL-12受體由IL-12Rβ1和IL-12Rβ2組成,兩鏈激活JAK-STAT(連接蛋白-信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,IL-12獨特的細胞效應(yīng)主要是由于STAT4的活化,由以下事例證明:遺傳上STAT4基因缺陷鼠和IL-p40缺陷鼠有同樣的表型。IL-12R主要由活化的T細胞、NK細胞、DC細胞和B細胞表達。

應(yīng)用[4][5]

用于登革熱患者血清IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10的變化及其臨床意義研究

探討登革熱(DF)患者血清中白細胞介素12p70(IL-12p70)、干擾素γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素6(IL-6)、白細胞介素10(IL-10)的變化及其臨床意義。

方法:對40例DF患者和18例健康對照者采用ELISA方法檢測外周血清IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10的水平,分析DF患者相關(guān)血清細胞因子的變化情況及其與健康對照組之間的差異,DF患者在不同病程階段和不同病情程度下血清IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10水平的變化情況及其相互之間的相關(guān)關(guān)系,并探討其在DV感染中的作用機制及其意義。

結(jié)果:1.DF患者血清IL-12p70、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平較健康對照組顯著升高(P<0.001,0.05,0.01,0.01);IL-6較健康對照組有所升高,但差異無顯著性(P>0.05)。

2. DF患者急性期,血清IL-12p70、IFN-γ和TNF-α水平較恢復(fù)期顯著升高(均P<0.01),IL-6和IL-10的水平有所降低,但差異無顯著性(P>0.05,0.05);IFN-γ/IL-6、IFN-γ/IL-10、TNF-α/IL-6和TNF-α/IL-10的比值均較恢復(fù)期顯著升高(P<0.001,0.001,0.01,0.01)。普通型DF急性期,IFN-γ/IL-6、IFN-γ/IL-10、TNF-α/IL-6和TNF-α/IL-10的比值也均較普通型DF恢復(fù)期顯著升高(P<0.01,0.05,0.05,0.01)

3. DF重型患者,血清IL-12p70、IFN-γ和TNF-α水平較普通型患者顯著升高(P<0.001,0.01,0.01),而IL-6、IL-10的水平有所降低,但差異無顯著性(P>0.05,0.05);IFN-γ/IL-6、IFN-γ/IL-10、TNF-α/IL-6和TNF-α/IL-10的比值均較普通型患者顯著升高(P<0.01,0.001,0.01,0.05)。

4. DF患者IL-12p70與TNF-α和IFN-γ之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(R=0.65,0.72;均P<0.001);TNF-α與IFN-γ之間存在顯著正相關(guān)(R=0.37,P<0.05);IL-6與IL-10之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(R=0.32,P<0.05)。DF患者急性期,IL-12p70與TNF-α、IFN-γ之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(R=0.56,0.59;均P<0.05)。DF患者恢復(fù)期,IL-12p70與TNF-α、IFN-γ之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(R=0.55,0.77;P<0.01,0.001)。

DF重型患者,IL-12p70與IFN-γ之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(R=0.60,P<0.05)。DF普通型患者,IL-12p70與TNF-α之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(R=0.69,P<0.001)。

參考文獻

[1]Immature Dengue Virus:A Veiled Pathogen?[J].Izabela A.Rodenhuis-Zybert,Hilde M.van der Schaar,Júlia M.da Silva Voorham,Heidi van der Ende-Metselaar,Huan-Yao Lei,Jan Wilschut,Jolanda M.Smit.PLOS Pathogens.2010(1)

[2]Clinical isolates of dengue virus with distinctive susceptibility to nitric oxide radical induce differential gene responses in THP-1 cells[J].Sukathida Ubol,Takol Chareonsirisuthigul,Jitra Kasisith,Chonticha Klungthong.Virology.2008(2)

[3]Dengue hemorrhagic fever with special emphasis on immunopathogenesis[J].Ichiro Kurane.Comparative Immunology,Microbiology and Infectious Diseases.2007(5)

[4]The pathology of dengue hemorrhagic fever[J].Anthony S.-Y.Leong,K.Thong Wong,Trishe Y.-M.Leong,Puay Hoon Tan,Pongsak Wannakrairot.Seminars in Diagnostic Pathology.2007(4)

[5]王晴晴.登革熱患者血清IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10的變化及其臨床意義[D].昆明醫(yī)學院,2010.

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