背景[1-3]
ANTI-TNF RECEPTOR II抗體是一類可以特異性結(jié)合TNF RECEPTOR II的多克隆抗體，主要用于檢測(cè)TNF RECEPTOR II的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中TNF RECEPTOR II水平。用純化的TNF RECEPTOR II抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入TNF RECEPTOR II，再與HRP標(biāo)記的TNF RECEPTOR II抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TNF RECEPTOR II呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中TNF RECEPTOR II濃度。
TNF受體在多種細(xì)胞中調(diào)控多種功能如：生長(zhǎng)、分化和凋亡。
TNF受體主要有兩種形式的分子。它們都是I類膜蛋白。由于兩個(gè)不同的配體TNFα、LT－α（lymphotoxine-α）可與兩個(gè)受體結(jié)合，TNF/TNFR系統(tǒng)的生物功能比CD95L/CD95系統(tǒng)（CD95，就是APO-1/Fas，APO-1/Ras為I型跨膜糖蛋白,分子量45KD,屬于NGF/TNF受體家族,廣泛分布于多種組織中）要復(fù)雜的多，同時(shí)對(duì)前者的了解也少的多。
TNF-α介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)，主要通過兩個(gè)結(jié)構(gòu)不同的受體進(jìn)行：1型受體（TNFR1，又稱作p60，p55，CD120a）和2型受體（TNFR2，又稱作p80，p75，CD120b）。兩種受體都是跨膜的糖蛋白，膜外N端區(qū)域具有多個(gè)半胱氨酸豐富的重復(fù)序列。雖然這兩種受體的膜外部分有結(jié)構(gòu)和功能上的同源性，但細(xì)胞膜內(nèi)部分卻完全不同，他們所介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路有所重疊，但也區(qū)別明顯。
應(yīng)用[4][5]
用于腫瘤壞死因子受體2在人非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及作為預(yù)后生物標(biāo)志物的潛在作用研究
腫瘤壞死因子受體1(TNFR1)和腫瘤壞死因子受體2(TNFR2)都是腫瘤壞死因子(TNF)的受體。由于它們不同的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域,這兩種受體在與TNF相互作用時(shí)引發(fā)不同的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。
TNFR1信號(hào)傳導(dǎo)途徑已被廣泛研究。它通過激活其細(xì)胞質(zhì)區(qū)域中的死亡結(jié)構(gòu)域來介導(dǎo)TNF的細(xì)胞毒性作用并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)途徑,這可能導(dǎo)致有效的抗腫瘤作用。
然而,與TNFR1相比,很少有研究去闡明TNFR2信號(hào)傳導(dǎo)途徑。TNFR2主要在T淋巴細(xì)胞,髓樣抑制細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞,心肌細(xì)胞,少突膠質(zhì)細(xì)胞和胸腺細(xì)胞中表達(dá),在抗炎過程和免疫調(diào)節(jié)中起重要作用。最近TNFR2在腫瘤進(jìn)展中的作用的相關(guān)研究有所增加。
TNFR2已被發(fā)現(xiàn)于各種腫瘤,如卵巢癌、乳腺癌、食道癌、骨髓瘤和結(jié)腸直腸癌,TNFR2被認(rèn)為是腫瘤促進(jìn)因子,通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖,激活免疫抑制細(xì)胞參與腫瘤進(jìn)展,并支持免疫逃逸。
然而,關(guān)于TNFR2在人NSCLC組織中的表達(dá)的研究極少,因此,研究TNFR2在NSCLC中的表達(dá),可能成為治療NSCLC的新靶點(diǎn)。
研究方法1.免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測(cè)收集的71名NSCLC患者的組織和對(duì)應(yīng)的25名癌旁非腫瘤組織的TNFR2蛋白的表達(dá)分布。
2.Western blot法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、H1299、H1975和正常肺上皮細(xì)胞Beas-2B的TNFR2蛋白的表達(dá),qRT-PCR檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、H1299、H1975和正常肺上皮細(xì)胞Beas-2B的TNFR2 mRNA的表達(dá)。
參考文獻(xiàn)
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