背景[1-3]
JNK123抗體是一類可以特異性結(jié)合JNK123的多克隆抗體，主要用于檢測JNK123的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實驗。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標本中JNK123水平。用純化的JNK123抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入JNK123，再與HRP標記的JNK123抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的JNK123呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中JNK123濃度。
C-Jun N末端激酶（JNK）也稱為絲裂原激活的蛋白激酶（MAPK8）。它屬于應(yīng)激激活蛋白激酶的MAPK超家族。MAPK是絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，可響應(yīng)多種細胞外刺激而被激活，并介導(dǎo)從細胞表面到細胞核的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。JNK參與多種細胞過程，例如增殖，分化，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和發(fā)育。JNK途徑受壓力和炎癥信號的刺激。由于差異的mRNA剪接，JNK被表達為十種不同的亞型。主要形式為JNK1和JNK2。
JNK123能夠使c-Jun(一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，屬亮氨酸拉鏈家族成員)氨基末端活性區(qū)Ser63和Ser73發(fā)生磷酸化的蛋白激酶。是促分裂原活化的蛋白激酶超家族中的一個家族，包括JNK1、JNK2、JNK3，當其活化模體Thr-Pro-Tyr內(nèi)的Thr、Tyr被JNKK1、JNKK2磷酸化后而激活，活化酶可磷酸化c-Jun等多種蛋白質(zhì)，從而影響細胞凋亡、炎癥和腫瘤的發(fā)生。
應(yīng)用[4][5]
用于谷氨酰胺誘導(dǎo)熱休克蛋白70高表達可抑制大鼠心房纖維化及縫隙連接蛋白43重構(gòu)研究
谷氨酰胺（glutamine，Gln）誘導(dǎo)熱休克蛋白70高表達對鹽酸異丙基腎上腺素（isoprenaline hydrochloride,ISOprenaline）所致的大鼠心房纖維化及縫隙連接蛋白43（connexin43，Cx43）重構(gòu)的影響及其機制。并與纈沙坦（valsartan）在抑制大鼠心房纖維化和縫隙連接蛋白43（Cx43）重構(gòu)中的作用進行比較，評價谷氨酰胺的應(yīng)用價值。
方法：該實驗共分為兩部分，具體實驗方法如下：部分實驗方法:40只SPF級雄性SD大鼠，體質(zhì)量（180±20）g，按隨機數(shù)字表法隨機等分為對照組、二甲基亞砜（DMSO）組（DMSO組）、鹽酸異丙腎上腺素（isoprenaline，ISO）5mg kg-1 d-1組（模型組）、ISO5mg kg-1 d-1+丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）0.75mg kg-1 d-1組（干預(yù)組）和ISO5mg kg-1 d-1+槲皮素（quercetin，QUE）100mg kg-1 d-1+Ala-Gln0.75mg kg-1 d-1+DMSO組（QUE組），每組8只大鼠。每組每天1次給予相應(yīng)試劑，7d后處死大鼠。免疫組化SP法半定量測定心肌組織中熱休克蛋白70（Hsp70）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2/3（p-JNK1/2/3）、c-Jun及Cx43蛋白的表達。
結(jié)果：DMSO組大鼠心房肌組織中AngⅡ含量與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），而模型組、干預(yù)組和QUE組則均顯著高于對照組（P均<0.01）。
參考文獻
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[2]Interactions between atrial electrical remodeling and autonomic remodeling:How to break the vicious cycle[J].Lilei Yu,Benjamin J.Scherlag,Yong Sha,Shaolong Li,Tushar Sharma,Hiroshi Nakagawa,Warren M.Jackman,Ralph Lazzara,Hong Jiang,Sunny S.Po.Heart Rhythm.2012(5)
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[4]Recent Clinical and Experimental Advances in Atrial Fibrillation[J].Shigeru Miyagawa,Taichi Sakaguchi,Hiroyuki Nishi,Yasushi Yoshikawa,Satsuki Fukushima,Shunsuke Saito,Yoshiki Sawa,C.Hassager,D.Leung,A.D.Szekely.ISRN Cardiology.2011
[5]鮑宏剛.谷氨酰胺誘導(dǎo)熱休克蛋白70高表達可抑制大鼠心房纖維化及縫隙連接蛋白43重構(gòu)[D].第四軍醫(yī)大學(xué),2013.