背景[1-3]
ANTI-C-MYC抗體是一類可以特異性結合ANTI-C-MYC的多克隆抗體，主要用于檢測ANTI-C-MYC的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學實驗。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標本中ANTI-C-MYC水平。用純化的ANTI-C-MYC抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ANTI-C-MYC，再與HRP標記的ANTI-C-MYC抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANTI-C-MYC呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中ANTI-C-MYC濃度。
c-myc基因是myc基因家族的重要成員之一，c-myc基因既是一種可易位基因，又是一種多種物質調節(jié)的可調節(jié)基因，也是一種可使細胞無限增殖，獲永生化功能，促進細胞分裂的基因，myc基因參于細胞凋零，c-myc基因與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展有關。
C-myc基因的產(chǎn)物為62KD的磷酸化蛋白P62c-mgc，是由C-myc基因的外顯子2和3共同編碼的由439個氨基酸組成的蛋白質，定位細胞核內，為核蛋白，依C-one編碼產(chǎn)物，功能分類，C-myc癌基因屬核蛋白基因，具有轉化細胞的能力，并具有與染色體、DNA結合的特性，在調節(jié)細胞生長、分化及惡性轉化中發(fā)揮作用。
C-Myc蛋白在結構上可分為轉錄激活區(qū)，非特異DNA結合區(qū)，核靶序列，堿性區(qū)，螺旋一環(huán)一螺旋(HLH)及亮氨酸拉鏈區(qū)，在已知的轉錄因子中可介導蛋白的寡聚化，這兩個區(qū)同時存在是C-myc蛋白所特有的，在其它蛋白質中，很少發(fā)現(xiàn)。
在C-Myc蛋白中，螺旋一環(huán)一螺旋緊隨著堿性區(qū)，揭示其以特異性序列方式和DNA相互作用。在以原核生物為實驗對象的研究表明，該堿性區(qū)以一個自由環(huán)存在，當以特殊方式結合到DNA上時，則變成螺旋，該區(qū)是C-Myc蛋白與DNA特異序列的結合部位。
應用[4][5]
用于MYC調節(jié)CHK1和CHK2引起鼻咽癌干細胞放射抵抗的機制研究
干細胞可以通過優(yōu)先激活CHK1和CHK2的細胞周期檢驗點,增加DNA修復能力從而引起輻射耐受。c-MYC基因是MYC基因家族的重要成員之一,是一種可使細胞無限增殖,獲永生化功能,促進細胞分裂的基因,因與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展有關。
c-MYC基因的表達一般與細胞的生長狀態(tài)有關,然而在細胞分化時c-MYC表達則降低,發(fā)現(xiàn)c-MYC在細胞GO期到S期的過程中也起作用。表明c-MYC表達的變化與細胞的增殖及分化狀態(tài)有關,其表達產(chǎn)物在調節(jié)細胞生長、分化或惡性轉化中發(fā)揮作用。
MYC可以通過抑制p27激活cyclin E/Cdk2使成纖維細胞靜止。以往的研究還表明,MYC可以同時激活p53和pten引起正常的和惡性干/祖細胞的分化,自我更新,及致瘤性。
根據(jù)PKH26熒光染料的特性,識別具有慢周期特性的PKH26+細胞,通過明確c-MYC對CHK1/2.的直接調節(jié)作用,闡述PKH26+細胞具有輻射抗性的機制,旨在揭示c-MYC介導的DNA損傷修復在鼻咽癌放療抵抗中的作用。
參考文獻
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[5]王雯珺.MYC調節(jié)CHK1和CHK2引起鼻咽癌干細胞放射抵抗的機制[D].南方醫(yī)科大學,2013.