"BALB/3T3 clone A31 Cell|小鼠胚胎成纖維細胞

細胞背景資料：胚胎；成纖維；自發(fā)永生；雄性；BALB/c

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

PLC-PRF-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞

KASUMI1細胞類似產(chǎn)品：：9L細胞、Daoy細胞、3T3-A31細胞

HCCLM3細胞類似產(chǎn)品：：HAEC細胞、NK92-MI細胞、HOP 92細胞

MSF細胞類似產(chǎn)品：：H2227細胞、AN-3細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞

CHO K1細胞類似產(chǎn)品：：RT-112細胞、RINm5F細胞、H-719細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BALB/3T3 clone A31 Cell|小鼠胚胎成纖維細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

H1623細胞類似產(chǎn)品：：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞

HuH6細胞類似產(chǎn)品：：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞

EFO 27細胞類似產(chǎn)品：：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞

BE2C細胞類似產(chǎn)品：：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

H1623細胞類似產(chǎn)品：：OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞

HuH6細胞類似產(chǎn)品：：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞

EFO 27細胞類似產(chǎn)品：：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞

BE2C細胞類似產(chǎn)品：：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內(nèi)，對整個細胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁，在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當，會導致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。

H-446細胞類似產(chǎn)品：：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞

A101D細胞類似產(chǎn)品：：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞

Fox/NY細胞類似產(chǎn)品：：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞

NPA'87細胞類似產(chǎn)品：：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞類似產(chǎn)品：：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞

U-138MG細胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞

MKN1細胞類似產(chǎn)品：：MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞

KAT5細胞類似產(chǎn)品：：HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞

OB2細胞類似產(chǎn)品：：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞

NCI H157細胞類似產(chǎn)品：：Hs-606-T細胞、HPAF/CD18細胞、KGN細胞

BALB/3T3 clone A31 Cell|小鼠胚胎成纖維細胞

Ocular Choroidal Melanoma-1細胞類似產(chǎn)品：：XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞

CAL-85-1細胞類似產(chǎn)品：：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞

NCIH187細胞類似產(chǎn)品：：J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞

SNK1細胞類似產(chǎn)品：：H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞

H1666細胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞

WM 2664細胞類似產(chǎn)品：：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞

HFT8810細胞類似產(chǎn)品：：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞

RF/6A細胞類似產(chǎn)品：：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞

UCLA RO-81-A-1細胞類似產(chǎn)品：：293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞

SuDHL 8細胞類似產(chǎn)品：：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞

Microbiological Associates-104細胞類似產(chǎn)品：：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞

CNE1-LUC細胞類似產(chǎn)品：：TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞

HCT 15細胞類似產(chǎn)品：：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞

PTK1細胞類似產(chǎn)品：：UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞

CAL 27細胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞

SHI1細胞類似產(chǎn)品：：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞

SW 579細胞類似產(chǎn)品：：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞

PANC403細胞類似產(chǎn)品：：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞

3T3L1細胞類似產(chǎn)品：：CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞

HcaF細胞類似產(chǎn)品：：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞

JVM-3細胞類似產(chǎn)品：：KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞

SVEC4-10細胞類似產(chǎn)品：：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞

GFP-Olig2細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞

PC 12細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞

KLM1細胞類似產(chǎn)品：：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞

University of Arizona Cell Culture-812細胞類似產(chǎn)品：：WEHI 231細胞、HCC-1143細胞、NCIH460細胞

H-650細胞類似產(chǎn)品：：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞

28SC細胞類似產(chǎn)品：：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞

OP9細胞類似產(chǎn)品：：SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞

BALB/3T3 clone A31 Cell|小鼠胚胎成纖維細胞

NCI-H676細胞類似產(chǎn)品：：SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞

GTL16細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞

TALL 1細胞類似產(chǎn)品：：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞

FAT細胞類似產(chǎn)品：：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞

Ramos (RA 1)細胞類似產(chǎn)品：：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞

RKO細胞類似產(chǎn)品：：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞

MDAPCa-2b細胞類似產(chǎn)品：：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞

SW48細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞

JeKo 1細胞類似產(chǎn)品：：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞

H2195細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞

SW-480細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞

MT-2J細胞類似產(chǎn)品：：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞

Hs-852-T細胞類似產(chǎn)品：：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞

HT 1080細胞類似產(chǎn)品：：KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞

WISH細胞類似產(chǎn)品：：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞

Lu99A細胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

IM-9細胞類似產(chǎn)品：：SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞

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