"Hs 578T Cell|人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對(duì)細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在GAO壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長，但時(shí)間長之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉GAO鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個(gè)別污染，可能是操作問題，就要注意操作。

細(xì)胞生長：貼壁

KYSE 140細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞

Hs729細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 08.13細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、EMT6細(xì)胞

U-251 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AML-EOL-1細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、BC-028細(xì)胞

NCIH740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：95C細(xì)胞、HME1細(xì)胞、RL-952細(xì)胞

AMO1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs870T細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Hs 578T Cell|人乳腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

MZ-CRC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞

NCI-H740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞

OCIAML4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞

A-101D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

MZ-CRC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞

NCI-H740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞

OCIAML4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞

A-101D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

NIH-3T3-L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞

RCM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞

CWR22R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞

R D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞

H-2122細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞

HaCaT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞

SCC 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞

NCI-H1623細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 320HSR細(xì)胞、HHUA細(xì)胞、ST486細(xì)胞

Jijoye細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞

JeKo-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞

Hs 578T Cell|人乳腺癌細(xì)胞

TE671細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞

NCI-H1793細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞

SU-DHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞

WM 266-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞

YES 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞

SNU-475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞

SNU-475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞

HFT 8810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞

CHP 100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞

YH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞

HCC-1954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞

J 111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞

LA-795細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NR 8383細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞、DHL6細(xì)胞

HFB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞

Caco2BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞

VMRC-LCD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞

CORL26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞

GM637細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞

HK-2 [Human kidney]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞

GC-2spd(ts)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞

H716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞

Clone 929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞

Duke University 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞

Duke University 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞

AR4-2J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞

CAL39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞

RCK-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞

NCI-H146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞

UPCI-SCC-154細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞

Hs 578T Cell|人乳腺癌細(xì)胞

CPA 47細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞

DU 4475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞

LUDLU-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞

COLO-320細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞

LCLC-103H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞

SF126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMH-2細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞

RT-BM 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞

BAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞

BAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞

BTI-TN5B1-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞

Jurkat細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞

P31 FUJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞

HCC2157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞

UACC812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞

ASPC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞

Astrocyte type I clone細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞

T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞

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