"NCI-H740 Cell|人肺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

H-2196細胞類似產(chǎn)品：：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞

Y3.AG.1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：Rat Fetal Lung-6細胞、C-4 I細胞、T241細胞

NL20細胞類似產(chǎn)品：：RIN m5F細胞、Colon 38細胞、COLO-829細胞

H838細胞類似產(chǎn)品：：E.G7-OVA細胞、MX1細胞、Mink細胞

DH-82細胞類似產(chǎn)品：：H196細胞、RCC10RGB細胞、AMO-1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H740 Cell|人肺癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

NPA 87細胞類似產(chǎn)品：：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞

NCIH1688細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞

MFD-1細胞類似產(chǎn)品：：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞

NIH3T3細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NPA 87細胞類似產(chǎn)品：：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞

NCIH1688細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞

MFD-1細胞類似產(chǎn)品：：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞

NIH3T3細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

J-774A.1細胞類似產(chǎn)品：：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞

WEHI 3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞

M4e細胞類似產(chǎn)品：：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞

HUT125細胞類似產(chǎn)品：：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞

D-341Med細胞類似產(chǎn)品：：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞

HCC 70細胞類似產(chǎn)品：：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞

DU4475細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞

H295R-S1細胞類似產(chǎn)品：：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞

H-2228細胞類似產(chǎn)品：：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞

293FT細胞類似產(chǎn)品：：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞

NCI-H740 Cell|人肺癌細胞

LAC細胞類似產(chǎn)品：：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞

EFM19細胞類似產(chǎn)品：：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞

hFOB 1.19細胞類似產(chǎn)品：：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞

OCILY10細胞類似產(chǎn)品：：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞

Roswell Park Memorial Institute 8226細胞類似產(chǎn)品：：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞

RASMCs細胞類似產(chǎn)品：：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞

RASMCs細胞類似產(chǎn)品：：U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞

WM-451Lu細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞

HEI-193細胞類似產(chǎn)品：：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞

Hs-281-T細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞

Hs-578T細胞類似產(chǎn)品：：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞

H-87細胞類似產(chǎn)品：：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞

EB1細胞類似產(chǎn)品：：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞

L6565細胞類似產(chǎn)品：：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞

COLO 699細胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞

H1651細胞類似產(chǎn)品：：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞

CEM.C1細胞類似產(chǎn)品：：10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞

McA-RH 7777細胞類似產(chǎn)品：：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞

CX-1細胞類似產(chǎn)品：：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞

KP-4細胞類似產(chǎn)品：：ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞

AR4-IP細胞類似產(chǎn)品：：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞

ROS17/28細胞類似產(chǎn)品：：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞

EB-1細胞類似產(chǎn)品：：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞

C42細胞類似產(chǎn)品：：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞

SKNMC細胞類似產(chǎn)品：：KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞

NIHOVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞

RBL-1細胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞

OKa-C-1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞

SuDHL 10細胞類似產(chǎn)品：：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞

NCI-H740 Cell|人肺癌細胞

Mouse podocyte細胞類似產(chǎn)品：：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞

X63-Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞

108CC15細胞類似產(chǎn)品：：OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞

H2172細胞類似產(chǎn)品：：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞

NCI-H358細胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞

SW 839細胞類似產(chǎn)品：：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞

PTK2細胞類似產(chǎn)品：：JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞

PE/CA-PJ34細胞類似產(chǎn)品：：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞

PE/CA-PJ34細胞類似產(chǎn)品：：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞

C2C12細胞類似產(chǎn)品：：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞

NCI-H2195細胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞

COLO394細胞類似產(chǎn)品：：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞

HBdSMC細胞類似產(chǎn)品：：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞

NUGC4細胞類似產(chǎn)品：：HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞

Rat 1細胞類似產(chǎn)品：：HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞

GP-293細胞類似產(chǎn)品：：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞

GM00346細胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞

"