"NCI-H1184 Cell|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞

C-8161細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLB-985細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、HMO6細(xì)胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、PLC細(xì)胞

207細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHOS細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、B-3細(xì)胞

WM266mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMC11細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H1184 Cell|人肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實驗，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。

Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞

HSF2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞

Colon-38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞

HCA-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞

HSF2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞

Colon-38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞

HCA-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

U-343MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞

NCI-H820細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞

HPAF-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞

NCI-H2110細(xì)胞類似產(chǎn)品：：E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞

SUDHL10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞

SKMEL28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞

T/GHA-VSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞

PBL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞

H-1915細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞

CHO K1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞

NCI-H1184 Cell|人肺癌細(xì)胞

MAntle cell VERona-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞

Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞

Ej138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞

KG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞

CO115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞

RPMI-8226S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞

RPMI-8226S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞

C32r細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞

Hs27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞

3T3-F442A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞

BHT-101細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞

HEK-293-FT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞

KM12SM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞

HFL-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞

MOLM-16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞

KU 812F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞

HOS-143B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞

NCI-H929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S3-HeLa細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞

NCI-H747細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞

RKO-AS-45-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞

A9(Hamprecht)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞

KYSE0030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞

KNS81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞

NCI-H358細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞

MIN-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC090細(xì)胞、DCS細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞

Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞

Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞

BMDC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞

HHL5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H322細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、DOK細(xì)胞

NCI-H1184 Cell|人肺癌細(xì)胞

HEK-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞

RWPE2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞

AK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、TE-13細(xì)胞

Onda 11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞

LL/2 (LLC1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞

SU-DHL-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BC-020細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞

K7M2 wt細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞

SCL-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞

SCL-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞

H2110細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞

Simpson細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞

SKMEL3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞

J-111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞

Panc 05.04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞

MRC9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞

GM02219D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞

B16 F10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-704細(xì)胞、253JBV細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞

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