"MGH-U3 Cell|人膀胱癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NCI-H660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞

NU-GC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-460細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞

ATDC5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L23/P細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞

Hs-343-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FL83B細(xì)胞、NWA細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞

BeWo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC/CAR細(xì)胞、A-253細(xì)胞、FAT細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

MGH-U3 Cell|人膀胱癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

OCI-Ly01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞

HIT T-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞

Walker256-TC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞

HBVP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

OCI-Ly01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞

HIT T-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL23細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞

Walker256-TC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞

HBVP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

NCI-H-295細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞

MDAMB435S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞

COLO-684細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞

HEK/293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞

DOK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞

CAL39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞

FOXNY細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞

SACC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞

NW38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞

Hs 578.Bst細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞

MGH-U3 Cell|人膀胱癌細(xì)胞

COV 504細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞

MFE 296細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞

U138MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞

SY5Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞

SK-UT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞

MRC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞

MRC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞

RBMVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞

KMST6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞

MESSA Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PASMCS細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、U251細(xì)胞

OC-316細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞

Hs 888Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞

293/EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞

H-838細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞

CCC-ESF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞

HOS TE85細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞

CPAE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞

H2286細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞

LM-TK-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞

MKN-74細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞

WRL 68細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞

RCC-JF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、T47D細(xì)胞、EFM19細(xì)胞

JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞

NCI-H157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞

NOZ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞

HRA-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞

Panc_03_27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞

HFT 8810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞

OCIAML5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞

MGH-U3 Cell|人膀胱癌細(xì)胞

Hs 819.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞

SKM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QBC-939細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞

32Dc3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞

MC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞

Tca8113細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞

HEK-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞

HCC-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞

A9 (Hamprecht)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞

P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞

HNE-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞

NCI-H1648細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞

NCI-H2085細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞

PFSK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞

Co320細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞

CCD-1112sk細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞

H2107細(xì)胞類似產(chǎn)品：：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞

Hs 611.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞

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