"COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細胞生長：貼壁

NCI-BL1339細胞類似產(chǎn)品：：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞

HS766T細胞類似產(chǎn)品：：CTLL(2)細胞、HTori-3細胞、GM05887A細胞

SK-CO-1細胞類似產(chǎn)品：：H-1734細胞、H82sclc細胞、GB1細胞

HMC3細胞類似產(chǎn)品：：LC-1Sq細胞、H.Ep. #2細胞、U373-MG細胞

8505C細胞類似產(chǎn)品：：NOR10細胞、UMNSAH-DF1細胞、KTCTL140細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

C3H/10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞

SNU398細胞類似產(chǎn)品：：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞

SNU-638細胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞

Capan2細胞類似產(chǎn)品：：H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

C3H/10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞

SNU398細胞類似產(chǎn)品：：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞

SNU-638細胞類似產(chǎn)品：：Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞

Capan2細胞類似產(chǎn)品：：H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

H1238細胞類似產(chǎn)品：：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞

PLC8024細胞類似產(chǎn)品：：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞

LNT-229細胞類似產(chǎn)品：：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞

HS688AT細胞類似產(chǎn)品：：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞

HEK293EBNA細胞類似產(chǎn)品：：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞

HSC（Human Schwann）細胞類似產(chǎn)品：：CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞

alpha TC1.6細胞類似產(chǎn)品：：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞

SW1222細胞類似產(chǎn)品：：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞

EC-GI細胞類似產(chǎn)品：：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞

KYSE510細胞類似產(chǎn)品：：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞

COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細胞

Sp2/mIL-6細胞類似產(chǎn)品：：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞類似產(chǎn)品：：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞

3T3J2細胞類似產(chǎn)品：：UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞

CD-18細胞類似產(chǎn)品：：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞

ST細胞類似產(chǎn)品：：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞

SKMel-5細胞類似產(chǎn)品：：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞

SKMel-5細胞類似產(chǎn)品：：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞

CCD841CoN細胞類似產(chǎn)品：：Molm 14細胞、Hep2細胞、Hs742T細胞

Adeno 293細胞類似產(chǎn)品：：COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞

GM03570細胞類似產(chǎn)品：：Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞

EJ-1細胞類似產(chǎn)品：：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞

SV40-HCEC細胞類似產(chǎn)品：：IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞

SK MES 1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞

SU-DHL-8細胞類似產(chǎn)品：：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞

Ramos 2G6.4C10細胞類似產(chǎn)品：：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞

C8161細胞類似產(chǎn)品：：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞

GM02219C細胞類似產(chǎn)品：：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞

SK-MEL-24細胞類似產(chǎn)品：：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞

Karpas-422細胞類似產(chǎn)品：：Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞類似產(chǎn)品：：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞

JB 6細胞類似產(chǎn)品：：H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞

AU 565細胞類似產(chǎn)品：：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞

NCI-BL1339細胞類似產(chǎn)品：：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞

Panc-3_27細胞類似產(chǎn)品：：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞

CNE-2Z細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞

Th17細胞類似產(chǎn)品：：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞

HM06.A1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞

IGROV-1細胞類似產(chǎn)品：：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞

TNC-1B12B4細胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞

COLO 738 Cell|人胸腔積液惡性纖維組織細胞

HPB/ALL細胞類似產(chǎn)品：：SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞

MIO-M1細胞類似產(chǎn)品：：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞

INS-1細胞類似產(chǎn)品：：BALL1細胞、22Rv1細胞、COLO 206細胞

COLO-320-DM細胞類似產(chǎn)品：：GEO細胞、KYSE-520細胞、SW1353細胞

Opossum Kidney細胞類似產(chǎn)品：：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞

P3J HR-1細胞類似產(chǎn)品：：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞

LLCPK1細胞類似產(chǎn)品：：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞

H2171細胞類似產(chǎn)品：：LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞

SK-MES細胞類似產(chǎn)品：：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞

A549ATCC細胞類似產(chǎn)品：：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞

H-1819細胞類似產(chǎn)品：：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞

P3J-HR-1細胞類似產(chǎn)品：：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞

KU.812細胞類似產(chǎn)品：：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞

OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞

L-cell細胞類似產(chǎn)品：：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞

H774細胞類似產(chǎn)品：：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞

SDBMSC細胞類似產(chǎn)品：：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞

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