"BC-022 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NCI-BL2141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞

AMO1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKO-AS-45-1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞

SNU-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA436細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞

HHFK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEMCSS細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞

V79-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293FT細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

BC-022 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

GT38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞

NK92-MI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞

H-1915細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞

TE-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

GT38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞

NK92-MI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞

H-1915細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞

TE-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

IPLB-SF 21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞

U-138MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞

DHL4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞

Hs 739.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞

SPC-A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞

PC 61.5.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞

KLE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞

PK15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞

HS852.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞

BEL/FU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞

BC-022 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

S91細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞

rRMECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞

HLCL9B10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞

NFHIOSE-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞

TE 354.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞

NB19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞

NB19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞

3T3-442A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞

HCC1008細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1588細(xì)胞、REC細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞

VCaP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞

EA.Hy926細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞

Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H128細(xì)胞、HASMC細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞

MRC 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞

A2780/CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-375SM細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞

174xCEM.T2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H446細(xì)胞、GA10細(xì)胞、H-460細(xì)胞

SK-MEL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞

IOSE 80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞

SW-780細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞

16HBE14o-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞

CAL 85-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞

Jurkat clone A3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞

MC-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞

Swiss 3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞

HCE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-A細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LUDLU-1細(xì)胞

LTEP a2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞

Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞

N-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞

Huh7.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞

SUIT2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞

BC-022 Cell|人乳腺癌細(xì)胞

HOP 62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞

RBL2H3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞

HEK293F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞

SW-1353細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AZ521細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞、C42細(xì)胞

TGHAVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞

JIMT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞

BE(2)-C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞

KYSE0410細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞

SHEP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞

MeSoTheliOma-211H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞

HCC1419細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞

SK-MEL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞

Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞

SUP-T1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞

LAN6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-8細(xì)胞、AD-293細(xì)胞、U373細(xì)胞

SNK-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞

HCC-1500細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞

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