"Ca759 Cell|小鼠乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：乳腺癌；雌性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

MDAMB-231細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞

SK-LU-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-Ly 3細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞、CV1細(xì)胞

LC1-Sq細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SCI1細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞

3T3-Swiss細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK Mel 24細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、GES-1細(xì)胞

VK2/E6E7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、J-774細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

Ca759 Cell|小鼠乳腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)缓笸ㄟ^(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

SKML-28細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞

ETCC007細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

NRK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

SKML-28細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞

ETCC007細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞

MCF-7/AdrR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞

NRK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）、無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（定環(huán)境下口語(yǔ)和書(shū)面語(yǔ)都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類(lèi)上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國(guó)際上美、英和日本等國(guó)已建有細(xì)胞庫(kù)；美國(guó)已有美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫(kù)或細(xì)胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細(xì)胞庫(kù)（HGMR）、細(xì)胞衰老細(xì)胞庫(kù)（CAR）等，其中ATCC不僅是美國(guó)也世界大的細(xì)胞庫(kù)。細(xì)胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無(wú)統(tǒng)一規(guī)定。對(duì)于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類(lèi)等條件穩(wěn)定即可，如用做長(zhǎng)期培養(yǎng)，別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說(shuō)明：組織來(lái)源：細(xì)胞供體所屬物種，來(lái)自人體或者動(dòng)物；個(gè)體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說(shuō)明臨床和病理診斷，以及病歷號(hào)等。細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)：了解細(xì)胞一般和殊的生物學(xué)性狀，如細(xì)胞一般形態(tài)，異結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和分裂指數(shù)，倍增時(shí)間，接種率等。如為腫瘤細(xì)胞，為說(shuō)明來(lái)源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對(duì)正常組織侵潤(rùn)力等實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說(shuō)明細(xì)胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類(lèi)、用量以及適宜PH值。

WEHI-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞

RTMC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞

R-1059-D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞

NOR-10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞

NCIH1048細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW-1573細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞

BT20細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞

SK-MEL-28細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞

NOZ細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞

MV-522細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞

EAC-E2G8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞

Ca759 Cell|小鼠乳腺癌細(xì)胞

JROECL 21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞

IPI-2I細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞

HBE 135-E6E7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞

MCF7/WT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞

KYSE 70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞

MS 751細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞

MS 751細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞

EOL1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞

U-hth74細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞

HCC-4006細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU869細(xì)胞、H-841細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞

BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞

U266-B1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞

Pa017C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞

LS-411N細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞

HTR-8/SVneo細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞

GM03569D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞

RH8994細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞

H766T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs27細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞

L6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞

OVCA8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞

8505C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞

HuP-T4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞

JM-Jurkat細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞

PC14細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞

GAK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞

AK細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、TE-13細(xì)胞

ZR75_1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞

Ca759 Cell|小鼠乳腺癌細(xì)胞

CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞

GM02132細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞

3T3J2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞

NCI-H226細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞

Hs832.Tc細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞

NCIH747細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞

M-G63細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞

CCRF細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞

Swiss3T3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞

NTERA-2 clone D1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞

LM3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞

U-118MG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞

GS9L細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞、RGE細(xì)胞

WiDr細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞

NB-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞

Jeko1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞

"