"CL1-0 Cell|人肺腺癌細胞

細胞背景資料：肺癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

D283細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞

Jurkat細胞類似產(chǎn)品：：Pt-K1細胞、LL2細胞、HEK-293 c18細胞

OCI/AML-2細胞類似產(chǎn)品：：HCC94細胞、MN-60細胞、MES-SA細胞

SK-MEL-MeWo細胞類似產(chǎn)品：：SP2-0-Ag14細胞、SKBr3細胞、SKNEP-1細胞

SNU5細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、MCF12F細胞、MEC-1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CL1-0 Cell|人肺腺癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

NK-10A細胞類似產(chǎn)品：：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

293/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞

H1944細胞類似產(chǎn)品：：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NK-10A細胞類似產(chǎn)品：：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

293/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞

H1944細胞類似產(chǎn)品：：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調端粒酶或下調端粒酶抑制物的活性)。用含可調節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

TE 85.T細胞類似產(chǎn)品：：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞

NCI-H1954細胞類似產(chǎn)品：：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞

HEL92.1.7細胞類似產(chǎn)品：：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞

MX-1細胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞

SU-DHL-4細胞類似產(chǎn)品：：NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞

G-292細胞類似產(chǎn)品：：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞

NCI-H1882細胞類似產(chǎn)品：：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞

MDA MB 231細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞

SVEC 4-10細胞類似產(chǎn)品：：H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞

Normal Rat Kidney-49F細胞類似產(chǎn)品：：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞

CL1-0 Cell|人肺腺癌細胞

LM6細胞類似產(chǎn)品：：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞

G361mel細胞類似產(chǎn)品：：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞

NCI-HUT-69細胞類似產(chǎn)品：：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞類似產(chǎn)品：：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞

BCaP 37細胞類似產(chǎn)品：：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞

PNT-1A細胞類似產(chǎn)品：：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞

PNT-1A細胞類似產(chǎn)品：：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞

KRC Y細胞類似產(chǎn)品：：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞

RF/6A細胞類似產(chǎn)品：：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞

IEC18細胞類似產(chǎn)品：：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞

C33-A細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞

HT 144細胞類似產(chǎn)品：：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞

MonoMac 6細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞

DU-4475細胞類似產(chǎn)品：：HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞

Lu99A細胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

ARH 77細胞類似產(chǎn)品：：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞

P30OHK細胞類似產(chǎn)品：：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞

HEC1B細胞類似產(chǎn)品：：PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞

HLE-B3細胞類似產(chǎn)品：：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞

HEK AD293細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞

HEK 293 c18細胞類似產(chǎn)品：：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞

EJ 138細胞類似產(chǎn)品：：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞

HMO6細胞類似產(chǎn)品：：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞

ID8/MOSEC細胞類似產(chǎn)品：：QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞

Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞類似產(chǎn)品：：18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞

Ku812細胞類似產(chǎn)品：：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞

A375.S2細胞類似產(chǎn)品：：DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞

SAS細胞類似產(chǎn)品：：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞

SF-539 BT細胞類似產(chǎn)品：：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞

CL1-0 Cell|人肺腺癌細胞

Karpas 422細胞類似產(chǎn)品：：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞

BNL-CL.2細胞類似產(chǎn)品：：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞

CII細胞類似產(chǎn)品：：MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞

HUT-125細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞

H716細胞類似產(chǎn)品：：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞

KATO III細胞類似產(chǎn)品：：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞

TMK1細胞類似產(chǎn)品：：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞

HSC5細胞類似產(chǎn)品：：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞

HSC5細胞類似產(chǎn)品：：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞

SJSA1細胞類似產(chǎn)品：：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞

MCF-10 Attached細胞類似產(chǎn)品：：NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞

DMS273細胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞

JTC-28細胞類似產(chǎn)品：：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞

L-5178-Y細胞類似產(chǎn)品：：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞

KNS-81細胞類似產(chǎn)品：：H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞

H-2228細胞類似產(chǎn)品：：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞

A-549細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞

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