"CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細胞

細胞背景資料：軟骨肉瘤；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

S37細胞類似產(chǎn)品：：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞

KBM-5細胞類似產(chǎn)品：：BPH-1細胞、TOV112細胞、Opossum Kidney細胞

NCI-H1573細胞類似產(chǎn)品：：CCD19-Lu細胞、NCIH2171細胞、SF763細胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞類似產(chǎn)品：：GH3細胞、H.Ep. No. 2細胞、H2198細胞

C2BBe1細胞類似產(chǎn)品：：B16-F10--RED細胞、RL95細胞、BL6細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很HAO時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。

HT 1376.T細胞類似產(chǎn)品：：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞

RS 4;11細胞類似產(chǎn)品：：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞

hUC-MSC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞

MES-SA-Dx5細胞類似產(chǎn)品：：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HT 1376.T細胞類似產(chǎn)品：：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞

RS 4;11細胞類似產(chǎn)品：：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞

hUC-MSC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞

MES-SA-Dx5細胞類似產(chǎn)品：：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

HCa/16A3-F細胞類似產(chǎn)品：：SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞

RERF-LC-MS細胞類似產(chǎn)品：：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞

PANC1005細胞類似產(chǎn)品：：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞

U343細胞類似產(chǎn)品：：HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞

hTERT-RPE細胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞

OVCAR 8細胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞

UMUC-3細胞類似產(chǎn)品：：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞

RWPE2細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞

HCC-1833細胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞

HuH-6細胞類似產(chǎn)品：：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞

CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細胞

Hs 695T細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞

MS-751細胞類似產(chǎn)品：：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞

Sp 2817細胞類似產(chǎn)品：：RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞

D6P2T細胞類似產(chǎn)品：：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞

BT-474細胞類似產(chǎn)品：：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞

FU-MMT-1細胞類似產(chǎn)品：：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞

FU-MMT-1細胞類似產(chǎn)品：：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞

293-EBNA1細胞類似產(chǎn)品：：NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞

Keio University-19-19細胞類似產(chǎn)品：：SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞

Liver-02細胞類似產(chǎn)品：：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞

AG 9細胞類似產(chǎn)品：：Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞

NT2細胞類似產(chǎn)品：：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞

ARO細胞類似產(chǎn)品：：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞

NCI-H2108細胞類似產(chǎn)品：：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞

LA-N-6細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞

Panc-327細胞類似產(chǎn)品：：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞

Madison lung細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞

NCI-SNU-449細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞

EFM-192B細胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞

251 MG細胞類似產(chǎn)品：：2BS細胞、NCIH1618細胞、Hep G2/C3A細胞

H510細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞

H-522細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞

H-2170細胞類似產(chǎn)品：：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞

MV411細胞類似產(chǎn)品：：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞

mRTEC細胞類似產(chǎn)品：：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞

MGECs細胞類似產(chǎn)品：：SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞

UMUC14細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞

LLCMK2細胞類似產(chǎn)品：：L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞

PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞類似產(chǎn)品：：SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞

CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細胞

CNE-2Z細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞

PZ-HPV-7細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞

MRC5細胞類似產(chǎn)品：：SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞

H-920細胞類似產(chǎn)品：：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞

NCIH3255細胞類似產(chǎn)品：：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞

UCLA RO-81-A-1細胞類似產(chǎn)品：：293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞

WM-239細胞類似產(chǎn)品：：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞

Hs 934.T細胞類似產(chǎn)品：：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞

HUCEC細胞類似產(chǎn)品：：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞

P30/Ohkubo細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞

SRA01/04 (HLE)細胞類似產(chǎn)品：：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞

A-101D細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞

NCI-H660細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞

H-719細胞類似產(chǎn)品：：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞

SK-MEL2細胞類似產(chǎn)品：：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞

NCIH244細胞類似產(chǎn)品：：LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞

SCC15細胞類似產(chǎn)品：：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞

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