"C166 Cell|小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：血管內(nèi)皮

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。

細(xì)胞生長：貼壁

LTPA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞

VERO C 1008細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IMCD3細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞

AC16 [Human hybrid]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU86.86細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞

HFSF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：526-mel細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、KMS26細(xì)胞

SNU601細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ly1細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

C166 Cell|小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

LCLC-103H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞

Leydig細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞

Hep 3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞

ECC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

LCLC-103H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞

Leydig細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞

Hep 3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞

ECC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

EVSAT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞

4T1-LUC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞

MM134細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞

R-1059-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞

COLO 320 DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞

130T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞

F442-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞

UMRC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞

M619細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞

NBL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞

C166 Cell|小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞

EST50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞

EMT6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NT-2細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞

Henrietta Lacks cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞

NCIH1792細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞

HCe-8693細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞

A2780 CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞

A2780 CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞

SCaBER細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞

Panc-08.13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞

CEK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞

L 132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、MES-13細(xì)胞、H1694細(xì)胞

TC-1[JHU-1]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞

ZR751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞

CEM-0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：33604細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞

WI-38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞

Hs 839.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞

PC-3M-IE8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞

MCF-7/ADR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞

CEM/0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞

OV-CA 432細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KLM-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、OP-9細(xì)胞

PAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞

HMEC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞

SKGIIIA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞

SKG3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞

MES-23.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞

HME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞

A549-Taxol細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞

Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞

LTEP-a-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BOWES細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞、A498細(xì)胞

C166 Cell|小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞

MBdSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞

MDAMB435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞

MSB1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞

H2444細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞

EST81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞

Astrocyte type I clone細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞

HuH 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞

LAN-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞

GC9811-P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞

H1048細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞

SCC-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞

1E8-H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞

LNCaP C4-2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞

SF767細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞

GM0637細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞

COLO-320-HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞

H510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞

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