"Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：宮頸；女性；HPV-１６轉(zhuǎn)化

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

ONS-76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3D4/21細(xì)胞、SC細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞

HS 1.Tes細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCFs細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、D-341細(xì)胞

SNU-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NGP細(xì)胞、C1R細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞

3T3L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CATHa細(xì)胞、38C13細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞

NCI-HUT-596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

MDA-MB-231-luc細(xì)胞類似產(chǎn)品：：211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞

T-HSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞

Tu 177細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞

LOU-NH-91細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

MDA-MB-231-luc細(xì)胞類似產(chǎn)品：：211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞

T-HSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞

Tu 177細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-4細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞、H-82細(xì)胞

LOU-NH-91細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

HCC 94細(xì)胞類似產(chǎn)品：：624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞

LC1sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞

NCI H508細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB9細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞、J45.01細(xì)胞

UCW 100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞

HCC-1937細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞

HCC1954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE280細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞、SKO3細(xì)胞

Nb2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞

SCC7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞

NCI-H1672細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞

J774 A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 895.T細(xì)胞、C-26細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞

Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細(xì)胞

MV-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞

TN5B14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞

Bat lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞

NCI-H295R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞

SKNMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞

H2030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞

H2030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞

HDMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞

GI-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞

B-cell with DC Morphology細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞

CAKI1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞

PC3-M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞

RIMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AKR細(xì)胞、H-2081細(xì)胞、H8細(xì)胞

WM 266-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞

BEL-7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞

H-441細(xì)胞類似產(chǎn)品：：769-P細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞

SU86_86細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞

OCI-Ly01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞

SU-DHL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞

CNE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞

GOS3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞

HCC0095細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞

EJ 138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞

Karpas-299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞

LIXC002細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞

Reuber H-35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞

ELD-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞

OCI/AML-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞

KP-N-YN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞

Ect1/E6E7 Cell|人宮頸永生化鱗狀細(xì)胞

NS653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞

PL12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞

IOSE80UBC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞

DLD 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞

U 138 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞

NCI-HUT-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞

Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞

S3 HeLa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞

U138MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞

HCC-2279細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞

Dami細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1954細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞

HLE-B3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞

L-428細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞

BLO11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞

K562/ADP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞

NCIH2110細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL1.0細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、LA 4細(xì)胞

EBNA-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞

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